食品生物技术考试重点.docxVIP

食品生物技术第一章绪论1 食品生物技术是指现代生命科学的研究成果为基础，结合现代工程技术手段和其他学科的研究成果，用全新的方法和手段设计新型的食品和食品原料2 食品生物技术研究的内容基因工程——用人工的方法把不同生物的遗传物质分离出来，在体外进行剪切、拼接、重组，形成基因重组体，然后再把重组体引入寄主细胞或个体中以得到高效表达，最终获得人们所需要的基因产物。一个典型的DNA重组实验通常包括以下几个步骤：1 提取供体生物的目的基因，通过限制性内切酶、DNA聚合酶连接到另一个载体的DNA分子上，形成一个新的重组DNA分子2将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化3对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定4对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外源基因是否表达2细胞工程——就是在细胞水平研究开发、利用各类细胞的工程。细胞工程研究的内容：1 组织与细胞培养技术2 细胞大量培养技术3 细胞器移植技术4 DNA重组技术5 外源基因导入技术6 细胞融合技术7 体外受精和胚胎移植技术8 染色体工程技术3蛋白质工程——就是通过对蛋白质化学、蛋白质体学和动力学的研究，获得有关蛋白质理化特性和分子特性的信息，在此基础上对编码蛋白的基因进行有目的的设计改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物系统，这个生物系统可以是转基因微生物、转基因植物、转基因动物，甚至可以是细胞系统。蛋白质工程主要从以下几方面开展研究通过改变酶促反应的Km和Vmax提高催化效率通过改变蛋白质对酸碱和温度稳定的适应范围，拓宽蛋白质的应用范围改变酶在非水溶剂中的反应性，可使蛋白在非生理条件下作用减少酶对辅助因子的需求，简化持续生产的过程增加酶对底物的亲和力，以增加酶的专一性，减少不必要的副反应提高对蛋白酶的抗性，可以简化纯化过程，提高产率改变酶的别构调节部位，减少反馈抑制，提高产物产率提高蛋白的抗氧化能力改变酶对底物的专一性改变蛋白发生作用的种属特异性4酶工程——是利用酶的催化作用进行物质转化的技术，是酶学理论、基因工程、蛋白质工程、发酵工程相结合而形成的一门新技术。它研究开发涉及的范围包括：自然界中新酶的开发和生产、酶分子的修饰、酶的分离纯化技术、酶的固定化技术、酶反应器、酶生物传感器5发酵工程——是生物技术的重要组成部分，是生物技术产业化的重要环节，是指酵母作用于果汁或发芽谷物产生CO2的现象。现代发酵工程是将微生物学、生物化学和化学工程等学科基本原理有机结合，是建立在基因工程技术基础上的一门应用技术性学科6生物工程下游技术——是指将发酵工程、酶工程、蛋白质工程和细胞工程生产的生物原料，经过提取、分离、纯化、加工等步骤，最终形成产品的技术第二章基因工程与食品产业1 基因工程的主要内容：概括来说，基因工程的操作过程一般分为4步。第一步，在供体细胞中用限制性内切酶切割基因，以分离出含有特定的基因片段或人工合成的基因并制备运载体（质粒，病毒或噬菌体）；第二步，把获得的目的基因与制备好的运载体DNA连接酶连接组成重组体；第三步，把重组体引入宿主细胞；第四步，筛选、鉴定出含有外源目的基因的菌体或个体工具酶和基因载体目的基因要进入宿主细胞，有两种方式，一种是直接导入，另一种是要通过载体的运载作用才能实现。这种在细胞内具有自我复制能力的运载目的基因；进入宿主细胞的运载体，叫基因工程载体Ⅱ型限制性内切酶的主要用途在特异位点上切割DNA，产生特异的限制性内切酶切割的DNA片段建立DNA分子的限制性内切酶物理图谱构建基因文库用限制性内切酶切出相同的黏性末端，以便重组DNADNA连接酶——能将两段DNA拼接起来的酶叫DNA连接酶连接带匹配黏端的DNA分子使平端的双链DNA分子互相连接或使合成的接头相连接DNA聚合酶将质粒和目的基因连接的方法：黏性末端人工接头衔接物同聚物末端加尾法（末端转移酶）T4DNA聚合酶的用途有：耐热DNA聚合酶（TaqDNA）可用于：DNA测序聚合酶链式反应（PCR）对DNA片段进行体外扩增末端转移酶主要用于：给载体或cDNA加上互补的同聚体DNA片段3’末端的放射同位素标记碱性磷酸酯酶——BAP（大肠杆菌）CIP(牛小肠)基因工程中碱性磷酸酯酶主要应用于：在序列分析中，验出序列去除DNA和RNA的5’-磷酸基去除载体DNA的5’磷酸基，防止自我环化放射性同位素的标记2理想的基因工程载体应具备以下特征：能在宿主细胞内进行独立和稳定的DNA自我复制。易于从宿主细胞中分离，并进行纯化在其他DNA序列中有适当的限制性内切酶单一酶切位点(MCS:多克隆位点)具有能够直接观察的表型特征，在插入外源DNA后，这些特征可以作为重组DNA选择的标志质粒是指自主复制的双链环状DNA分子，在细菌中独立于染色体之外而存在质粒的要求：质粒载体的相对分