黄曲霉毒素Blt1gt快速检测试剂盒的研制.pdfVIP

摘要 黄曲霉毒素BI具有很强的毒性，1988年被国际癌症机构列为A类致癌物质。黄曲霉 毒素会降低动物的产奶产蛋量，危害人类的健康，对经济也造成一定的影响。为了对黄曲 霉毒素进行有效监控，必须有灵敏、特异、快速、可靠、容易普及的方法进行检测。本项 奠定基础。 案，初次免疫为AFTBI．BSA结合完全弗氏佐剂，足挚免疫，问隔四周后结合不完全弗氏 佐剂加强免疫小鼠，最后一次免疫后三周通过尾静脉或腹腔冲击免疫小鼠，N四天后耿 脾进行细胞融合。 在免疫方案实施的同时，确立检测方法，以棋盘滴定试验确定抗原I：100包被，免疫 氧化物酶标记羊抗鼠IgGl：400稀释。 利用杂交瘤技术将免疫BaN小鼠得到的脾细胞与SP2／0小鼠骨髓瘤细胞融合，『白J接 ELISA方法筛选阳性细胞株。经过八次融合，多次筛选，都得不到稳定的阳性细胞株，故 而进行了多克隆抗体的制备。 通过免疫家兔，获得阳性血清，以J下辛酸．硫酸铵沉淀方法纯化血清，用免疫印迹实验 证明了该血清是抗黄曲霉毒素Bt的多抗，间接ELISA法测得纯化后的多抗效价为2．56× 105，『自J接性竞争法测得该抗体对黄曲霉毒素BI的最低检出浓度为0．05№／ml。 关键词：黄曲霉毒索BI：单克隆抗体；多克隆抗体；ELISA 3 ABSTRACT was international Aflatoxin rankedA BI(AFTB0hastoxicity,which carcinogenby strong whenanimals cancer in1988．The ofmilkand willbedecreased organization production eggs the intakefodder isharmtothe italsoinfluence pollutedbyAFTBt．AFTBj people，and economy． to Itis to a andreliabledetectionmethodinorder necessarydevelopsensitive，specific，quick thecontentlevelofAflatoxin aimofour isto themonoclonal monitor Bi．The study prepare for of AFTBland afoundationof ELISAmethoddetection antibodies lay development against AFTBt． their andOVA This consulted methods，andAFTBI documents，improvedprepared study many