家蚕线粒体nd2coⅰ和若干的克隆及序列分析3.pdfVIP

动物学报 　48 (3) :375～383 , 2002 A cta Zoologica S inica 　　　　　 　 家蚕线粒体 ND2 、CO Ⅰ和若干t RNA 基因 的克隆及序列分析 廖顺尧　刘运强　鲁　成 　周泽扬　向仲怀 ( 西南农业大学蚕桑丝绸学院 , 农业部蚕桑学重点开放实验室 , 重庆 400716) 摘 　要 　克隆并测定了家蚕 ( Bombyx mori) 线粒体基因组 3 468 bp 的 EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切片段序列 , 根据 序列同源性比较 , 该 DNA 片段包括 3 个蛋白质编码基因 : ND2 基因、CO Ⅰ基因和CO Ⅱ基因5′端399 bp 的序 列 , 以及6 个 tRNA 基因和一个尚待确定的 tRNAMet 基因。家蚕与果蝇的 ND2 基因序列同源性约 697 % , CO Ⅰ 基因的同源性约 838 % , CO Ⅱ基因5′端的同源性约80 % , 这表明细胞色素氧化酶基因在物种间比烟酰胺腺嘌呤 二核苷酸脱氢酶基因保守。6 个推定的 tRNA 基因序列与果蝇相应 tRNA 基因序列差异较大。另外 , 除 tRNAGln 基因的二级结构相似外 , 其它 tRNA 基因的二级结构与果蝇相应 tRNA 基因的二级结构也有较大差异。 关键词 　家蚕 　线粒体基因组 　35 kb 片段 　基因组成 　基因结构 ( ) 　　线粒体 DNA 的发现 , 为核外遗传系统的研究 出家蚕 原文称桑蚕 卵线粒体 DNA 的 Hind Ⅲ、 展开了新的一页。动物线粒体 DNA 是共价闭合的 B am H Ⅰ和Pst Ⅰ的限制性内切酶图谱。凌建华等 环状双链 DNA , 分为重链 ( H 链) 和轻链 ( L ( 1993) 对家蚕蛹线粒体 DNA 进行 9 种限制性内 ) ( ) 链 , 分子量较小 15～20 kb 。一般动物线粒体 切酶单酶切和双酶切 , 构建了家蚕蛹的限制性内切 基因组包括 13 个编码疏水性蛋白质亚基基因、22 酶图谱 , 并且发现家蚕二化品种与多化品种的 个 t RNA 基因、2 个 rRNA 基因和非编码序列 (包 mtDNA 限制性内切酶图谱有差异 , 与蓖麻蚕的 ) 含复制起点区域 。其中 , 除一个蛋白质基因 mtDNA 限制性内切酶图谱有显著差异。沈兴家等 (ND6) 和 8 个 t RNA 基因由 L 链编码外 , 其余都 (2000) 分别克隆了家蚕线粒体基因组 Eco R Ⅰ19 由 H 链编码。各基因排列紧密 , 不含内含子 , 且 kb 和 2 0 kb 片段 , 并分析了序列的基因组成和基 有些基因区域出现重叠。从 Anderson 等人 ( 1981) 因结构以及与果蝇线粒体基因组的同源性。 对人线粒体 DNA 进行了全序列测定开始 , 目前已 本研究克隆了家蚕线粒体 DNA 的 35 kb 左右 有 70 多种动物的线粒体 DNA 都进行了序列测定 的 EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切片段 , 序列测定后 , 对 (Boore , et al . , 1998) 。在昆虫方面 , 目前已获得 其进行了基因组成和基因结构分析 , 以及片段所含 果蝇 ( Drosophila yakuba 和 D . melanogaster ) 、蚊