貂分离株n蛋白基因的遗传多样性和功能分析.pdfVIP

维普资讯 河南农业科 学 犬瘟热病毒貉 、狐 、貂分离株 N蛋 白基 因的 遗传多样性和功能分析 王君玮 ，张 维 ，李 林 ，赵永刚 ，姜 平 ，王志亮 ，孙承英 ，任炜杰 ，王 珊 (1．南京农业大学 动物医学院，江苏 南京 210095；2．中国动物卫生与流行病学中心，山东 青 岛266114) 摘要 ：为分析从不同地 区分离的犬瘟热病毒 (CDV)毒株的抗原性差异，对 5个CDV分离株和 1个 CDV弱毒疫苗株的N蛋 白基 因进行 了核苷酸测序 ，并与 l1个参考毒株进行 了比较 。结果表明，5 个分离株之间核苷酸序列同源性达 94．5 ～99．8 。China(国内疫苗株)与分离株 的核苷酸序列 同源性普遍较低 (90．9 ～93．5 )。分离株之 间氨基酸序列 同源性差别大 (87．9 ～100 )，其 中，HT—P与THD1的氨基酸序列同源性为 100 ；而与China疫苗株氨基酸同源性普遍较低 ，为 89．7 ～91．8 。China疫苗株与Onderstepoort有着很高的同源性 ，同源性 比例分别为 97．1％。 分析结果显示 ，最近 CDV 的流行和免疫失败现象发生，与国内所用疫苗毒株和野毒株的遗传 关系 甚远有关。 关键词：犬瘟热病毒；CDV；N基因；遗传分析 中图分类号 ：$829．2 文献标识码 ：A 文章编号：1004—3268(2007)03—0105—04 犬瘟热病毒 (CDV)是犬科动物 (犬 、澳洲野犬、 2006年6～1O月，在山东及其周边省份流行 的 狐狸 、山狗、豺和狼)[1]和鼬科动物最重要 的病毒性 CDV分离株 中，选择具有代表性 的 5个地方株和 目 疾病 的病 原 ，在 非免疫兽 中发病 率和致死率很 前在市场广泛使用的CDV弱毒苗毒株克隆其 N基 高 [2。]。此外 ，该病毒也可感染其他动物 ，如熊猫 、 因并测序，构建 CDVN蛋 白系统发生树 ；分析 目前 熊、狮子和老虎等。CDV为副黏病毒科麻疹病毒 所用疫苗株与流行毒株 的 N 蛋 白差异 ，以期对 属，病毒粒子直径 150～330am[3]。基 因组为不分 CDV基因疫苗以及免疫机制的研究提供依据 。 节、非重叠 的负链 RNA，约 15．7kb，主要编码核衣 1 材料和方法 壳蛋 白(N)、融合蛋 白(F)、血凝或附着蛋 白(H)、基 质膜蛋白(M)、大蛋白(L)和磷蛋 白(P)。核衣壳 由 1．1 茵种 、质粒、毒株、细胞 囊膜包裹 ，其 内部为 M，表面为 H和 F 个糖蛋 白组 E．coli．Competent CellDH5a。pM D18一 T 成的纤突。负链 RNA被 1个螺旋状衣壳包裹 ，主 simplevector，购 自TaKaRa；pGEM—T EasyVec— 要 由N蛋白组成。N 蛋 白是保守性最强 的免疫原 tor(Amp)，Promega公司。VERO细胞 由本单位 性蛋白，在病毒感染时可引起强烈的抗体反应 ，对 中心细胞室保存 。CDV弱毒疫苗株 ，购 自国内某疫 病毒装配 、转录和复制过程起调控作用 。 苗生产厂。 收稿 日期 ：2006一l1—13 基金项 目：青岛市科技发展计划项 目(05—2一Jc一78) 作者简介 ；王君玮(1968一)，男，山东临沂人 ，副研究员，在读博士研究生 ，主要从事动物疾病诊断技术和基 因工程疫苗研究。 济性状开发利用。边选育、边推广 ，提高经济效益 ， 参考文献 ； 增强市场竞争力。其次 ，从长远 目标看 ，育种方向应 [1] 高柏绿，徐海明．浙系新 昌长毛兔 良种选育研究 [J]．中 突出豫丰黄兔 I系、Ⅱ系、Ⅲ系的优 良性状和遗传基 国养兔杂志 ，2006(2)：10一 l1． 因，使优中更优 。第三 ，豫丰