猪肝脏蛋白质组双向电泳体系的建立及优化 Proteome Analysis of Pork Liver by Two-Dimensional Gel Electrophoresis.pdfVIP

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2017-12-17 发布于上海
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猪肝脏蛋白质组双向电泳体系的建立及优化 Proteome Analysis of Pork Liver by Two-Dimensional Gel Electrophoresis.pdf

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猪肝脏蛋白质组双向电泳体系的建立及优化 Proteome Analysis of Pork Liver by Two-Dimensional Gel Electrophoresis

肉类研究 2011，Vo1．25,No．11 嚣覆篙盏 MEATRESEARCH 基础研究猪肝脏蛋白质组双向电泳体系的建立及优化王新洁，韩剑众，曲道峰 (浙江工商大学食品与生物工程学院，浙江省食品安全重点实验室，浙江杭州 310035) 摘要：建立猪肝脏蛋白质组的双向电泳体系，并从样品处理、电泳参数、染色方法等方面对该体系进行优化。样品处理采用超速离心法，Cleanup试剂盒处理，17cmpH5～8的双向电泳预制干胶条，蛋白上样量 120laL，得出匹配率为76％，蛋白点有 1412±8个。参照全盲法，对各种不同的猪肝脏样品进行准确性和重复性实验，样品匹配率均在 70％以上，且图谱中点的相对迁移率都在实验室的控制标准之内，可以筛选出既具有统计学意义又具有量分析意义的蛋白点，也可用于区分不同的猪肝脏样品。该体系能满足不同猪肝脏样品的双向电泳分析。关键词：猪；肝脏；蛋白质组；双向电泳；优化 ProteomeAnalysisofPorkLiverbyTwo—DimensionalGelElectrophoresis WANGXin-jie，HANJian—zhong，QUDao—feng (KeyLaboratoryofFoodSafetyofZhejiangProvince，CollegeofFoodScienceandBiotechnology， Zh~iangGongshangUniversity，Hangzhou 310035，China) Abstract：IIlthepresentstudy，atwodimensional(2-DE)gdelectrophoresissystemwasestablishedandoptimizedforpork liverproteome．ThesamplepreparationwasachievedusingultracentrifugationandcleanupkitsnadreadyIPGstripsImmobilineMT DryStripgel(17cmandpH5—8)wereusedatasampleloadinglevelof120 L，resultinginamatchingrateof76％and1412±8 proteinspots．Accordingtohteottalblindnessmehtod，accuracyandrepeatabilitytestswereperformedondifferentporkliver samples，showingamatchingrateofover70％ nadspotshavingarelativemobilitywithinhtelaboratory controlstandards． Therefore，proteni spotshavingstatisticalsignificnacena dallownigqunatiattivenaalysiscouldbescreenedoutnadbeusedfor thedifferentiationofporkliversma ples．Inconclusion，hteestablishedsystem Cna allow 2-DE gelelecrtophoresisofsample porkliversamples． Keywords：pork；liver；proteome；twodimensionalgelelectrophoresis(2-DE)；optimization 中图分类号：Q816 文献标识码：A 文章编号：1001．8123(2011)11-0001—05 近年来，蛋白质组学成为探索生物体生物学机制的