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日粮锌、硒水平对肉鸡肠道Igh+浆细胞分布的影响
王子旭余锐萍陈越陈耀星
(中国农业大学动物医学院北京100094)
摘 要:为了探讨微量元素锌和硒互作对内鸡肠追黏膜屏障结构的影响,将24只1日龄hA
肉鸡随机分3组,分别饲喂添加有高辞高硒(辞1000mg/kg、硒5mg/kg)、低锌低硒(锌34mg/kg,
浆细胞及阳性反应物的数量及分布变化.结果表明:lgE浆细胞及阳性枷质散在分布于小肠绒
毛顶端,固有层、脯腺周围以及盲肠黏膜固有屡和盲脯扁桃体的淋巴小结周围.在常锌常硒
组,Ig^+浆蛔胞的敷量及lgA阳性反应物比较多,而低锌低硒组和高锌高硒组的IgA浆细胞数
量及lgh阳性反应物数量减少。高锌高硒组减少曼为明显.结论:低蘑低锌或高硒高锌对内
鸡肠道均有毒性作用,破坏了膊黏膜的正常免疫屏障结构,从而影响了腑黏膜的免疫功能。
日粮中按辞5(kg/kg、硒0.15mg/kg的比例添加,对于堆持肺遭黏虞的正常屏障蛄构是合适的.
关键词:辞硒lgh+浆细胞肉鸡
锌和硒作为动物体的必需微量元素,其对机体免疫功能的影响及其二者间的相互作
用,一直倍受人们的关注。许多研究报道锌和硒作为免疫器官生长发育和免疫应答所必需
的营养因子,是宣接参与免疫功能的重要生命相关元素。但是,锌和硒并不是独立地发挥
其生物学作用,而是相互影响和制约“’2‘“。例如:低硒或高硒日粮可导致肉鸡肾脏发生
增生性病变,病变的程度可受日粮中锌含量的影响,即在日粮中加入高锌或低锌就使病变
加重,而加入正常的锌则可缓解低硒或高硒导致的病理损伤。相反,高或低锌日粮引起的
肉鸡肾脏病理损伤的程度也受日粮中硒含量的影响,即被低或高硒所加重,但被正常量的
硒所缓解…。肠道和呼吸道黏膜免疫作为免疫系统的第一道防线“’。但有关锌和硒互作对
黏膜免疫功能的影响的报道尚不多。因此,本实验拟分析饲料中锌、硒剂量过高或过低时
对肉鸡肠道IgA阳性浆细胞及阳性物质数量的影响,旨在研究阐明锌、硒互作对肠道黏膜
免疫的影响。为合理使用锌、硒微量元素提供一些形态学依据。
1材料与方法
1.1动物分组将24只1日龄健康从商晶代肉鸡随机分成三组,每组8只。各组除了
依照实验要求饲喂添加不同剂量的硒、锌日粮外,均按常规方法饲养。
日粮中硒锌各设置3个水平,即亚缺乏量(低锌低硒组)、营养需要量(常锌常硒组)
和亚中毒剂量(高锌高硒组),各实验组日粮硒锌含量见表l。按添加量精确称取亚硒酸
钠(NaSe03,分析纯)和硫酸锌(ZnS047H20)烘干至恒重,研磨过200目筛,先混入少量
石粉及麦麸中作为预混料,后逐级稀释,充分混匀于各实验组日粮中。为了确保所添加的
-142.
硒和锌功效稳定,硒锌预混料于每周配料前现用现配。其中把含锌50mg/kg和含硒
o.15mg/kg的第2组做为对照组。
墨!鱼壅堕塑旦整塑:璧堡生坐兰!竺芝竖!
一.
垄塞 !望!垩箜至量望! !丝!塑墨塑! i塑!垩主篓量塑!
硒0.08 0.15 5
锌 34 50 1000
1.2取材和染色实验用鸡于45日龄剖杀,取十二指肠、空肠、回肠和盲肠等,80%酒
精或4%多聚甲醛磷酸缓冲液(pH7.4)固定,石蜡包埋,连续切片10张,厚5脚。石蜡
切片经二甲苯脱蜡和下行酒精至水,按常规ABC法进行免疫组化染色,显示肠黏膜内IgA’
PBS 7.4
浆细胞。其中,一抗使用小鼠抗鸡IgA单抗(1:100倍稀释,用0.Olmol/Lpll
配制),孵育2小时(37。C)。阴性对照组染色用0.Olmol/LPBS代替~抗血清。结果判定
为镜下抗原阳性信号呈现棕红色或棕黄色颗粒或团块状。
1.3数据处理光镜下详细观察和检测了每组的十二指肠、空肠、回肠、盲肠的IgA阳性
反应物的数量和分布,统计了肠黏膜的顶部、中部、底部(肠腺周围)的每单位面积内
据进行组间方差分析和多重比较。实验结果用均数±标准差(x±s)表示,PO.05为差
异有显著性。
2结果
免疫组织化学染色结果表明,ISA
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