多基因联合检测指导晚期非小细胞肺癌辅助治疗的临床研究.docVIP

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多基因联合检测指导晚期非小细胞肺癌辅助治疗的临床研究

精品论文 参考文献 多基因联合检测指导晚期非小细胞肺癌辅助治疗的临床研究 尹志永1 杨大勇1 杨立丰2 李 华3 王铁军3 陈丽娜1   1.秦皇岛市第二医院胸外科 河北 昌黎 066600;2.秦皇岛市第二医院神经外科 河北 昌黎 066600;3.秦皇岛市第二医院检验科 河北 昌黎 066600   【中图分类号】G633.91 【文献标识码】A   【文章编号】1008-6315(2015)12-0303-02     肺癌(carcinoma)是最常见的肿瘤之一,目前已成为造成女性或者男性死亡的首位癌症,其中NSCLC 最为常见,占所有肺癌的80%以上.且70%的NSCLC在发现时已属晚期,失去手术及多学科综合治疗的机会.晚期NSCLC 目前仍以联合化疗为主,但由于肿瘤本身及不同病人之间异质性,而且同一种病理类型和分期的NSCLC对于同一种化疗方案的敏感性差异很大,却不可避免的经历了化疗的毒副作用.其有效率只有20%-40%,中位生存期8-10 个月,五年生存率不到15%.因此,正确有效的使用化疗药物显得尤为重要. 本研究通过对比分析以胸水或静脉血中ERCC1、RRM1、TYMS与TUBB3表达量选择化疗方案与直接进行顺铂、吉西他滨联合治疗两种化疗方法的临床疗效、生存期和不良反应发生情况,探究ERCC1、RRM1、TYMS与TUBB3检测在指导晚期NSCLC个体化治疗的临床意义. 1 资料和方法   1.1 一般资料 随机选取我院2012年10月至2013年10月我院胸外科住院治疗的晚期NSCLC患者68例,纳入标准为:①临床症状符合NSCLC诊断标准;②经CT检查证实存在肿瘤病灶,均经气管镜活检或穿刺或胸水病理确诊;③肿瘤分期属于Ⅲb和Ⅳ期;④初诊且未经过治疗;⑤体力状况评分(ECOGPS评分)小于3(5分法),且生存期大于3个月;排除感染性疾病、肝肾疾病、慢性心脏病等疾病,以及合并其他系统疾病.随机将所有患者分为研究组和对照组两组,两组间一般资料均无显著性意义(P>0.05),具有可比性.所有研究对象及其家属知晓本次研究内容并签署知情同意书.   1.2 ERCC1、RRM1、TYMS和TUBB3基因表达检测 肿瘤相关基因mRNA 表达水平实时荧光定量PCR检测试剂盒为南京生兴生物公司产品.血液(液体样本)总RNA 快速提取试剂盒(离心柱型)、cDNA 合成试剂盒、pGM-T 载体试剂盒均为Bioteke公司产品.在实验组患者入组后(未开展化疗)进行穿刺获得胸水(40毫升)或抽取静脉血(10毫升)做为样本,按照试剂盒操作步骤首先进行总RNA 提取,通过琼脂凝胶电泳检测其纯度,并使用分光光度仪测得D260nm/D280nm在1.7-2.1之间.然后按照cDNA 合成试剂盒操作步骤进行cDNA 合成,将所得cDNA 经PCR扩增后得到目的DNA.选用pGM-T载体试剂盒进行TA 克隆,所得质粒进行PCR鉴定,并测序鉴定所得产物序列的正确性.选用肿瘤相关基因mRNA 表达水平实时荧光定量PCR检测试剂盒,按操作步骤进行,将质粒标准品及管家基因质粒标准品等比稀释成6个浓度后进行SYBR荧光实时定量PCR检测,反应条件:聚合酶的活化20s,95℃,PCR 扩增40个循环.检测出质粒样本中ERCC1、RRM1和TUBB3基因的mRNA 表达量,按照表达量的多少分为无表达、低表达和高表达.   1.3 个体化化疗方案 研究组患者根据ERCC1、RRM1、TYMS和TUBB3基因表达量确定化疗方案:ERCC1基因低表达或无表达者采取以铂类为主的两种药物治疗,RRM1基因低表达或无表达者采取吉西他滨单药治疗或以吉西他滨为主的两种药物治疗,TYMS 低表达者采用培美曲塞二钠单药治疗,TUBB3基因高表达者需避免使用紫杉类化疗药物.研究组共计出现以下6类情况:ERCC1和RRM1低表达或无表达,而TUBB3基因高表达者6例,采取顺铂与吉西他滨共同治疗;ERCC1、RRM1和TUBB3基因均呈现低表达或无表达8例,采取顺铂与吉西他滨共同治疗;ERCC1和TUBB3基因高表达,而RRM1低表达或无表达5例,采取吉西他滨单独治疗;ERCC1和RRM1高表达,而TUBB3基因低表达者6例,采取多西他赛单独治疗;ERCC1和TUBB3 低表达,而RRM1 基因高表达者10 例,采取多西他赛与顺铂共同治疗.TYMS低表达者5例,采用培美曲塞二钠单药治疗.对照组患者均采取顺铂与吉西他滨共同治疗.用药剂量根据体表面积给予常规治疗,严重者可适当加量.用药期间患者若出现恶心、呕吐、出血等不适症状,可适当给予止吐、补充血小板等对症治疗以缓解不良反应.   1.4 疗效判断 在患者化疗至少4 周期后进行疗效判断,判断标准为RECISE1.0.判定结局

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