子痫前期患者胎盘组织中VIP及其受体1的表达及意义.docVIP

精品论文 参考文献 子痫前期患者胎盘组织中VIP及其受体1的表达及意义 陈兰钦1 胡继芬 2(1福建省平潭医院妇产科 350400)(2福建医科大学附一医院妇产科 350005) 【摘要】目的 本研究的目的是研究VIP及其受体VIP-1在正常妊娠和轻、重度子痫前期患者胎盘中的变化的趋势，进一步研究VIP在子痫前期发病中的作用。方法 应用免疫组织化学方法检测VIP、及其受体VIP-1在胎盘组织中的表达水平。结果 在正常妊娠和轻、重度子痫前期患者胎盘中检测到了VIP及其受体VIP-1的表达，子痫前期组胎盘VIP及VIP-1的表达量显著低于对照组(Plt;0.01)，且随着病情程度的加重,各组胎盘中VIP的表达量呈下降的趋势，重度子痫前期组胎盘VIP的表达量显著低于轻度子痫前期组( Plt;0.01)。结论 VIP可能通过舒张血管和抗炎作用维持正常妊娠，在子痫前期发病中起重要作用。 【关键词】子痫前期 血管活性肠肽 血管活性肠肽受体1 子痫前期(preeclampsia，PE)是属于妊娠期高血压疾病（hypertesive disorders in pregnancy）分类中较严重的一种类型，是妊娠期特有的疾病，严重影响母婴健康，是孕产妇和围生儿病率及死亡率的主要原因。近年来许多研究发现血管活性肠肽（vasoactine intrestinal peptide，VIP）具有多种生物学功能，并与妊娠有着密切关系[1-2]。但VIP及其受体在人妊娠胎盘中表达情况，特别是子痫前期胎盘中以及二者在子痫前期中的作用在国内外均少有研究。许多研究表明，VIP具有抗炎[3]和舒张血管[4,5]作用，而过度炎症反应、过氧化应激反应和血管活性物质失衡所致的全身小动脉痉挛是子痫前期重要的病理生理过程。本研究采用免疫组化方法检测子痫患者胎盘组织中的VIP和VPACI受体（VIP-1受体）的表达，以探讨其与子痫前期发病的关系。 资料与方法 一、研究对象 选择2010年8月至2011年11月在福建医科大学第一附属医院和平潭县医院住院分娩的轻、重子痫前期各15例，平均年龄26plusmn;4.3岁，均为单胎初产，选择同期与子痫前期组年龄和孕周相匹配的单胎初产未临产剖宫产正常孕妇20 例为对照组，平均年龄25plusmn;3.6岁，排除肝炎、肾病、糖尿病等产科合并症及并发症。子痫前期的诊断与分类参照丰有吉、沈铿主编的《妇产科学》供8年制及7年制临床医学等专业用第二版。 二、方法 1、标本的收集及处理 两组孕妇均在胎盘娩出5分钟内取胎盘标本，无菌状态下在胎盘母面距脐带附着处2cm避开钙化坏死区，取胎盘组织块约1cmtimes;1cmtimes;1cm，生理盐水漂洗后，用10％甲醛固定，常规石蜡包埋切片。 2、第二代通用型二步法免疫组织化学检测 兔抗人血管活性肠肽抗体（1：200）、兔抗人血管活性肠肽受体-1抗体（1：100）、第二代通用型二步法检测系统（pv-9000）、DAB显色剂均购自北京博奥森生物技术公司，按试剂说明书操作，以PBS 液代替一抗作阴性对照。 3、免疫组织化学分析方法 以肺部组织为阳性对照，以PBS代替一抗为阴性对照。由两位病理科医师盲法阅片，显微镜400倍镜下随机观察10个视野，每个视野计数100个细胞数中的阳性细胞数。判定标准：①染色程度分为4级：基本不着色者为0分，着色淡者为1分，着色适中者为2分，着色深者为3分；②着色细胞占计数百分率：le;5%为0分，6%-25%为1分，26-50%为2分，ge;51%为3分。将滋养叶细胞着色程度与着色百分率得分乘积结果分为：0-1为阴性，2-3为+，4-6分为++，6分以上为+++。其中小于++为低表达，大于++为高表达。 三、结果 1、VIP及其受体1在胎盘中表达定位分析 VIP在对照组胎盘组织中，主要表达于胎盘合体滋养细胞（附图1）、蜕膜细胞的细胞浆及细胞膜，胎盘绒毛内血管内皮细胞及间质细胞周围的平滑肌细胞等未见到VIP的阳性表达。子痫前期组胎盘VIP在表达部位上与对照组无明显差异，但表达明显减弱（附图2、3）。 VIP受体1与VIP在胎盘组织中的在表达部位上一致（附图4）。子痫前期组胎盘VIP在表达部位上与对照组无明显差异，但表达明显减弱（附图5、6）。 2、各组胎盘组织VIP及其受体1表达量的比较 子痫前期组胎盘VIP的表达量显著低于对照组(Plt;0.01)，且随着病情程度的加重,各组胎盘中VIP的表达量