H3、H5、H7、H9亚型流感病毒通用多表位重组鸡痘病毒构建.pdfVIP

·5篮· 免疫攀杂志第23卷第5囊∞孵年9莠粼溅蕊瓣矗l。弦嘿筏辘猢。签№．5s尊。猫7 H3、H5、H7、H9亚型流感病毒通用多表位重组鸡痘病毒构建 陈叉锋b2，金宁一’，贾雷立3，鲁会军’，南文龙’”，髯绢尧罐，昧晓月1”，马海剃’一，马呜潇k2，剃 点实验室，长春130062；3．军事医学科学院痰病预防所，北京100ar71) 【摘要] 目的构建表达m、彤、丑f7、l粉噩型流感病毒通用多袭位重组鸡瘟病毒活载体疫苗候选株。方法筛选流感 NANP 瘸毒主要抗原(HA M)优势抗原表位基因，以生物信息学软件优化其排列结构合成流感多表位基因(E西)，以郴、肿HA 融合表达基因为骨架，将多表位基陵播入构建搬}沦秘糙l醢阕读众，定惠克畿歪鸡痘病毒表达载体磷瓢-2复含寝动子 (觚孓职．5x∞)下游，构建重组鸡痘瘸毒中闻转移载体艘二辩潋．脚蠡-115壬lA。应用脂质侉介导的转染法，将该重缀鸡痘病 搬中间转移载体与282E4株鸡痘病毒共转染鸡胚成纤维细胞(a霉)，经舶dU进行3次加压筛选挑斑纯化后传代，并对重组以 鸡痘病毒进行阳t和姒检测和We姊嘶blot分析。结果 成功构建了重组鸡痘瘸毒中间转移载体m二m隧耻}15H是， 凇t、封隐纛獭嘁嗽融徐测阳性。缎论簿选獭稳定共表达磷}嚣}羧基医帮逶慧多表位基嚣瓣重组鸡痰病毒vl}l珏瞰ll缸 融H5HA株，该重组鸡瘢病毒的构建为跨种通用型流感病毒活载体疫蔚的研究奠定了物质基础。 [关键词】重组鸡瘦病毒；多表位基因(Epi)；构建 【中豳分类号】鼹黢。65 【文藏撂谈码】A 氍封隧强融塔，口唾炎唔毋，嚣度￡蔗·嚣，王露瓤0疆，嚣蛾餮函蚤鼢g，弧矗嚣旋盼y∞，C强溱)【主a伊y辩，淞薹弑一嚣，凇 a洒m) NANP 0f劬I嗍A 郴，Ir7，and鹏讥．枞‰哪0pe删0f㈧枷鲫(HAM)d a弧啪s WillI th蚰。伊岫糟6孵tedt}坼阳嘲僦n触edv∞咐珊埘HW282E律8岫iIIundh 懒啪蠡瞳v酏鼢pIrrA—2．H7IIA-E噼H5HA．．Ik n埽坤e- bjh馘蜘oftIle嘲甲阳妇 粥蛔B遗饿。，嗍碰昀。酗凼‰蒯＆鼬鼢嘲簖羽羚参鄹淞醛硒歉妇羽眄蝴嘲咖赫啪黼鼬．‰静 【K哆w岫】R∞删嚏b诚幻蛳洒；捌翻娃ple印洳p姻；cIm啦攘魅a旺 近年来，流感病毒在自然选择和人为选择压力 行使用的各种疫苗，但流感病毒变异频繁，血清型众 下变异速度在加快，其跨越种间障碍传播的机率槛 多，而且型间无交叉保护，这给疫苗的研制造成了很 逐渐翔大，并频频见剜有关艟盎Ⅳ(磷、辩、融囊 大困难。霉蓠，处于不同实验室研究阶段的流感大 型)感染人和其它哺乳动物的报道【l。5】，因此加重了 人们对流感大流行发生的担忧。疫苗接种作为控制 毒灭活疫苗、重配全病毒灭活疫苗、重配冷适应株、 流感的一种主要手段，受到多个匡家致府的高度关 重配减毒摄疫精、常规熬8重配全瘸毒灭嚣疫苗、反 注。自199r7年人们便开始研究可能用于流感大流向遗传PR8重配裂解疫菌等【6，7】。 而根据流感病毒抗原表位来研制疫苗，不仅可 【黢羲曩期】∞孵一∞一弱；【修霾骞期】20孵一岱一驾 有效地餐耀流感病毒筋保护性抗原，增强免疫应答 【基金项目】教育部重点璜麓306∞6)和富张省科技发展许潮重戈磺的特异性，而且可通过选择具有交叉保护性的抗原 目(加06∞∞)赞助 表位来达到预防多个毒株的目的，尤其是可通过疫 f作者簿贪】艨义锋(19r79一)，男，河南南鹣市人，硕士擞，主要从事动 耱分子癌毒擎辑究。≤稻)∞l毒醛92s；《蚤础)森一情盗测及嚣重合成抗原表位，快速应对流感疫情的蔓 卿@163．㈨ 延。重组鸡痘