天然橡胶中水溶性蛋白质含量测定及对豚鼠的过敏反应.docVIP

天然橡胶中水溶性蛋白质含量测定及对豚鼠的过敏反应 中国药事2010年第24卷第8期759 天然橡胶中水溶性蛋白质含量测定及对豚鼠的过敏反应 陈芳,杨敏,张毅兰(国家食品药品监督管理局药品包装材料科研检验中心,上海2012O3) 摘要:目的建立天然橡胶中水溶性蛋白质的含量测定方法,考察天然橡胶对豚鼠的过敏反应,并初步 探讨降低天然橡胶中蛋白质含量的方法.方法酸沉淀,碱复溶后采用比色法测定蛋白质的含量.采用豚 鼠评价天然橡胶的过敏反应.结果蛋白质在10~200/,g?mL-范围内线性良好(r一0.9996).豚鼠对天然 橡胶提取液具有明显的过敏反应症状;对清洗液无过敏症状.结论该方法准确,重现性好,可用于测定天然 橡胶中水溶性蛋白质的含量.水溶性蛋白质会引起豚鼠的过敏反应,但可以通过反复清洗降低或避免. 关键词:天然橡胶;水溶性蛋白质;过敏反应 中图分类号:R927.2;R965文献标识码:A文章编号:1002—7777(2010)08—0759—03 DeterminationofWaterSolubleProteininNaturalRubberandItsAllergicReactiontoGuineaPig ChenFang,YangMinandZhangYilan(SFDAPharmaceuticalPackagingMaterialResearchandInspection Center,Shanghai201203) ABSTRACT:0bjectiveToestablishthemethodfordeterminationofwatersolubleproteininnatura1 rubber,evaluatetheallergicreactiontoguineapigandpreliminarilyresearchthereductionmethodsof protein1eve1.MethodsUsecolorimetrytoquantitatetheproteinafteracidprecipitationandre-dissolution. Evaluatetheallergicreactiontoguineapig.ResultsThegoodlinearityrangewas10～2OOg?mL-(r一 0.9996).Theguineapighadsignificantallergicreactiontoextractingsolutionofnaturalrubberwhileno reactiontowashingsolution.ConclusionThemethodisaccurate,reliableandreproducible.Itcanbeused todeterminetheamountofwatersolubleproteininnaturalrubber.Thewatersolubleproteinwouldcause allergy,butwhichcanbereducedoravoidedbywashingtherubberrepeatedly. KEYWORDS:naturalrubber~watersolubleprotein;allergicreaction 天然橡胶塞的天然胶系由橡胶树的胶乳制造而 成,其配方和工艺复杂,易导致人体产生过敏反 应[1≈].为此国家食品药品监督管理局(SFDA) 在2005年底已全面淘汰天然胶塞. 由于天然橡胶制品中只有水溶性蛋白质能够从 胶塞中溶解出来,是导致过敏反应甚至休克死亡的 主要原因_4J.本研究测定了天然橡胶中水溶性蛋 白质的量及其对豚鼠的过敏反应,并初步探讨了降 低其所含蛋白含量的方法. 1仪器与试药 UV-2401PC型紫外一可见分光光度计(日本岛 津);HZ92015型恒温振荡器Ck仓市科教器材 厂);TGL-16B型离心机(上海安亭科学仪器厂). 卵清蛋白(Sigma公司,含量gt;98,批号: 113K7OO1);Folin试剂(Sigma—Aldrich公司,批 号:106KO127).天然橡胶l和2(分别为A和B 厂产品).试剂均为分析纯.豚鼠(体重250～ 350g,上海实验动物中心). 2方法与结果 2.1溶液配制 试剂A:取碳酸钠2.22g,氢氧化钠0.44g, 酒石酸钠0.18g,加水溶解并定容至100mL. 试剂B:取五水合硫酸铜7.Og,加水溶解并 定容至100mL. 试剂C:分别取试剂A150mL和试剂B1mL 混合,即得.临用前配制. 作者简介:陈芳,硕士,助理研究员;Tel:(0218305;E-mail:chenfang2001@hotmail.corn 760中国药事2