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2018-04-06 发布于北京
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犬瘟热病毒N基因原核表达质粒的构建.pdf

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犬瘟热病毒N基因原核表达质粒的构建.pdf

贵州农业科学2011。39(7)：153～155 Guizhou Sciences Agricultural 犬瘟热病毒N基因原核表达质粒的构建周莉1，刘志杰1，曾智勇1’孙，汤德元1，李谦1，王彬1，张晓杰1，甘振磊1，王凤 (1．贵州大学动物科学学院，贵州贵阳550025}2．贵州省动物疫病研究室，贵州贵阳550025) [摘要]为了对N蛋白表达作为诊断用抗原、检测犬瘟热病毒(CDV)特异性抗体提供参考依据，以已 572 构建的含犬瘟热病毒N基因的pMDl8一N质粒为模板。利用特异性引物进行PCR扩增。得到1bp的N 基因开放阅读框，将所得N基因克隆至经相同双酶切处理后的pET32a(+)原核表达载体中，获得重组质粒框正确，经IPTG诱导表达出分子量约为75kDa的重组N蛋白。 [关键词]犬瘟热病毒；N基因；原核表达；构建 [中图分类号]$852．65 [文献标识码]A of Vector Construction of ProkaryoticExpression NGeneofCanine Virus Distemper ZHOU Lil，LIU ，TANG Qianl， Zhi—jiel，ZENGZhi—yon91·2。 De-yuanl，LI WANGBinl，ZHANGGANZhen—leil，WANG Xiao—jiel Fen91 AnimalScience．Guizhou 550025；2．Guiahou (1．Collegeof University。Guiyang，GuizhouLaboratory Animal 550025，China) for EpidemicDisease，Guiyang，Guizhou offeraccordancewithN as and CDV Abstract：To proteinexpressiondiagnosisantigendetecting N ontheconstructed8一N canine virus specificantibody。based PMDlplasmidcontainingdistempergene。the frameof1572 was chain one of openreading bp amplifiedbypolymerasereaction(PCR)usingpair and withthesame N wasclonedinto primers．Ngene pET32a(+)weredigested procedure，thengene recombinant wasidentifiedandtransfo