狂犬病病毒SRV9株磷酸化蛋白P基因和基质蛋白M基因重组质粒的构建.pdfVIP

新疆农业科学2014，51(12)：2296—2300 Sciences Xinji锄gA研cultuml 1001—4330．2014．12．024 doi：10．6048／j．issIL 狂犬病病毒SRV9株磷酸化蛋白P基因和 基质蛋白M基因重组质粒的构建 苏晓慧，夏婷婷，翟少华，简子健 (新疆农业大学，鸟鲁木齐830052) 摘要：【目的】重组狂犬病病毒sRv9株磷酸化蛋白的P基因和基质蛋白的M基因，为构建狂犬病毒(SRv9) 全长cDNA提供技术支撑。【方法】设计重组PcR引物，分别扩增sRV，的P基因和M基因，构建重组质粒 曲IDl8一PM，并对重组质粒进行酶切、测序鉴定。【结果】PcR扩增的sRV，的P基因和M基因大小分别为 893 bp和608 501 99．66％和99．67％。融合基因PM片段大小为lbp，与预期大小相同，且融合完全。【结论】应用重组 PcR成功融合狂犬病病毒sRV。磷酸化蛋白P基因和基质蛋白M基因，为后续构建病毒全长cDNA及感染性 克隆莫定基础。 关键词：狂犬病病毒sRV。；磷酸化蛋白；基质蛋白；重组PCR；基因融合 中图分类号：s852．65 文献标识码：A 文章编号：1001—4330【2014)12—2296—05 of ProteiII Co璐tructionRecombin锄tPl鼬mid Phosphorylated GeneP锄dMa们xProteinMGeneofR曲iesvir吣SR、侉 SU Xiao—hui，XIA Ting—ting，ZHAIShao—hua，JIANZi—jian (c0Z姆e矿％抛一∞可舭i聊，痢耐nng铆c砒M删溉溉蚵，u．兀肌舛830052，c^讥口) recoH妇n粕t Abst糟ct：【objec戗ve】negenesencodingphosphorylated m蚰奴阳)tein pro￡ein(P)蚰d n幽esvim8 werecons劬ctedintlle for cDNAoftllis (M)of sRV9 paperbuildingfuU—lengtll Vims．【Mem· P蛐d眦trix Mofrabiesvirus dlereconlbi- od】鸭e proteingene were锄plmedby phosphoproteingene sRV9 n孤tPCRt0constmctrec锄bin舭t rec锄biIlaIltw∞iden曲ed pLasmidpMDl8一PM．强e pIDduct byenzy瑚t- ic 8nd P锄dM 0f were893and608 homolo- digestionsequencing．【ResIllt】AmplifiedgenessRv9 bp bp，跚d w鹊99．66％明d wit}Ithe virus intlle g)r 99．67％，respectively，comparedSRV9出ies8equencepublished