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·实验研究·
携带报告基因EGFP的CXCR4RNA干扰质粒的
构建及生物活性的鉴定
杜岳峰1 邢毅飞1 肖亚军1 曾甫清1 王美玉2 陆鹏1 刘先艮
[摘要] 目的：构建携带报告堆同EGFP的CXCR4RNA下扰质粒，证实其高效抑制靶基凼表达的生物活
interfering
性。方法：没汁有发夹状结构的两条DNA序列，用PCR扩增CXCR4特异性小干扰RNA(srnalI
RNA．s[RNA)，转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的pGensilI质粒，转化DH5a晡株，提取质
粒行酶埘及测序鉴定。重组质粒转染PC3m细胞株，榆测绿色荧光蛋白表达及刘钿胞CXCRl表达的抑制情况；
结果：成功构建了CXCRI靶向的RNAT扰质粒pOenad1／siCX(R4，在靶细胞可同时表达siRNA及绿色荧光蛋
1／siCX(?R4质粒的成功构建刘利用基因干扰技术治疗前列腺癌转移方面的研究奠定了一定的
白。结论：pGensil
实骑基础。
[关键词]RNA干扰；趋化四f受体4；绿色荧光蛋白；前列腺肿痛
1420(2008)04—0305—04
[中图分类号]R737．25[文献标识码]A[文章编号]1001
ConstructionofCXCR4RNA vector
interferingencodingreportergene
EGFPanditsidentificationfor
biologicalactivity
DU XING
Yuefengl Yiy?ilzENGFuqinglWANG．MeiyutLUPen91LIUXfanyini
(1 of Affiliatedto Medical U
Tongji College，Hun
DepartmentUrology，Unionhospital Zhong
ofScienceand of
niversity Urology，Second
AffiliatedtoXi’arl
hospital JiaoTongUniversity)
constructCXCR4RNA vector EGFPandtO
AbstractObiective：To encodingreportergene
interfering explore
in DNAse—
the ofCXCR4inhibitionsiRNAthetreatmentof cancer．Methods：2
therapeuticpotential by prostate
small struc
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