水稻不同品种叶表面硅质细胞的扫描电镜观察研究.pdfVIP

水稻不同品种叶表面硅质细胞的扫描电镜观察 杨秉耀‘ 陈新芳1刘向东2郭海滨2 (1华f轲农业大学电镜宝：2广东省植物分子育种重点实验室，，。东广州510642) 水稻是我国虽主要粮食作物之‘，我国在水稻育种上取得举世瞩目的成就，特别是水稻矮化 育种和杂种优势利用的成功使我国水稻产量得以大幅度提高，为改善我国人民生活和稳定社会作 出巨大的贡献【lJ。近年来，随着对环境问题目益重视。已严格控制在粮食、蔬菜、水果生产中使 用有机磷等毒性强、残留量大的农药，从而确保对人旮的安全卫生，这就提出了一个尽可能不用 农药而又使水稻不被病虫为害的重人课题。另外，由于南方雨季通常风力较大，水稻倒伏问题也 较严重，所以水稻抗倒伏问题也急需解决。基于以上原因育种学家在水稻新品种选育中既要考虑 高产优质又要考虑多抗性，包括抗病、抗虫和抗倒伏等．准确有效地筛选多抗品种成为育种工作 的一个重要目标“j。 水稻植株(包括穗、叶、茎等)均含有硅质细胞，特别是水稻叶片的硅含量很高，其表面分 布着两种形状的硅质体，称之为哑铃形硅质体和“乳突”硅质体，在水稻种子表面也沉积有称之 为“乳突”的硅质体结构[2-3-4]。这些硅质细胞是否与多抗性有关I”，也就是说不同的多抗性水稻 品种闯硅质细胞的形态是否有差异，目前还未见深入报道。本文针对不同抗性的水稻品种，通过 扫描电子显微镜观察叶表面硅质细胞，并运用x．射线能谱分析其硅元素含量，以了解水稻硅化 程度与多抗性的关系，为筛选多抗种质提供理论依据。 1材料与方法 1．1材料 sativaL．)种植于华南农业大学农学院试验农场，品种为：P23，零轮， 实验用水稻(Oryza 广陆矮4号-4x(四倍体)，L202，D27F2(野生稻杂种)，华粳籼74，矮脚南特—4x(四倍体)和E5 等品种。 1．2扫描电镜制样与方法 分别取水稻各品种顶叶下第四片叶的中部，用于扫描电镜形态观察的样品采用4％戊二醛固 乙醇梯度脱水，乙酸异戊酯过渡，液化COzHCP-2临界点干燥，毋．5离子溅射仪镀金属膜，扫描 电镜观察。用于x射线能谱分析的样品采用4％戊二醛固定48h，0．1mol／L磷酸缓冲液浸洗，30％、 50％、70％、80％、90％、100％乙醇梯度脱水。乙酸异戊酯过渡，液化C02HCP．2临界点干燥， H5GB型真空喷镀仪镀碳膜。用FEI飞利酒XL．30扫描电镜进行观察和能谱分析。数据统计采 用区靖祥等(2002)编的“DT”统计软件16J。 2结果与分析 2．1水稻不同品种的硅质细胞形态和硅元素相对含量 扫描电镜观察发现，8个品种硅质细胞大小平均长×宽为14．83×10．84um，面积平均值为 u 164．44m2。变异系数为0．3811％，硅质细胞从火到小依次顺序为矮脚南特—4x广陆矮4号一4x 基金项目：国家自然科学基金资助项目(No 5，6)和j1。陆矮4号(图3，4)碎质细胞的K-×宽分别为22．0X137l_tm,ftl15 4x12．5lain；零轮 硅质细胞长X宽为15．4×11．7 HlIl(图1，2)，居第三：华粳74最小，其K×宽比矮脚南特．4x 的小2．6倍，比广陆矮4号一4X的小1．7倍。8个品种 气孔硅突数平均为5．5个，其中最多的为8个，分别是J1陆矮4号．4X和矮脚南特-4X，最少的 其硅细胞之间的硅突数也较多，最少一个(图1)，最多有三个(图4，5)。 x射线能谱分析结果表明，8个品种闻叶表面硅元素含量平均22．97wt％，标准差为5．9482．变 异系数为0．2105％，其中最高的是矮脚南特-4X，达3277％(图9)；广陆矮4号-4X次之，为25．8％ (图8)；P23含量最低，仅为7．82％。进一步对不同{＆种问硅含量进行多重比较，差异达到极显 著水准，说明水稻叶表面的硅含量与抗性及品种基因型有密切的关系。硅质细胞大小与硅含量相 关分析表明，相关系数为0．85310，6226(a=0．oD，两者相关极显著。 表1水稻8个不同品种叶片硅质细胞、气孔硅乳突和Si相对含量的比较 2．2不同品种植株抗病虫性与抗倒性的田问观察 经过2年早晚4季的田间种植观察，发现不同品种在自然种植条件下，在抗病性