梯度板法与试管法检测献血者ABO血型方法学比较.docVIP

精品论文 参考文献 梯度板法与试管法检测献血者ABO血型方法学比较 李运琴 郭超群 来祝檩 　　（河南省焦作市中心血站 454000） 　　【摘要】目的 对梯度板法与试管法检测ABO血型的方法学进行比较，探讨梯度板法应用于采供血机构的可行性。方法 选取已知血型血液标本、试剂红细胞，使用梯度板法和试管法分别检测ABO血型；观测梯度板法在无偿献血者ABO血型检测时的应用情况。结果 梯度板法对已知血型血液标本、试剂红细胞的检测结果均正确，与试管法结果一致；对无偿献血者血液标本检测结果一次判定正确率为99.5%；对ABO亚型及不规则抗体的检出能力强。结论 梯度板法适用于采供血机构对大批量无偿献血者血液标本的血型检测，值得推广应用。 　　【关键词】 梯度板法 试管法 ABO血型 　　【中图分类号】R 446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）03-0265-01 　　确保无偿献血者ABO血型检测结果准确可靠，是临床用血安全的基础。常用的献血者血型检测方法有平板法、微板法和试管法[1]，近年来梯度板法也在部分血站得到了应用[2-3]。我站引进了一套基于梯度板法检测原理的全自动血型仪，为了验证其应用效果，笔者对梯度板法与试管法检测无偿献血者ABO血型的方法学进行了比较，现报告如下。 　　1. 材料与方法 　　1.1 研究对象 2013年1月至2013年6月本站无偿献血者血液标本20477份。 　　1.2 试剂 抗-A、抗-B标准血清(上海血液生物医药有限责任公司提供)；ABO试剂红细胞、A2红细胞、A2B红细胞(上海血液生物医药有限责任公司提供)。以上试剂均经中国药品生物制品检定所批检合格，在有效期内使用。 　　1.3 主要仪器 Xantus全自动血型仪（瑞士Xantus双机械臂全自动加样仪，与深圳爱康医疗电子有限公司的Poseidon数字血型仪整合而成）；120孔V型梯度板(日本Olympus公司)；96孔平底微板(浙江台州市黄岩五洲医用塑料厂)；KA-2200细胞洗涤离心机(日本KUBOTA)。 　　1.4 方法 　　1.4.1 选取已知ABO血型的血液标本160份，使用梯度板法和试管法分别检测ABO血型。 　　1.4.2 将ABO试剂红细胞、A2红细胞、A2B红细胞作为普通血液标本，分别使用梯度板法和试管法检测ABO血型。 　　1.4.3 梯度板法常规应用于无偿献血者血液标本的ABO血型检测，正反定型结果不符时，应用试管法进行进一步鉴定。必要时，进行吸收放散实验[4]。 　　1.5 质量控制 每次实验前，用抗-A、抗-B标准血清与ABO试剂红细胞进行相互验证，以确保试剂的有效性[5]；每年参加卫生部临床检验中心组织的血型检测室间质量评价活动。 　　2. 结果 　　2.1 已知血型血液标本检测结果 已知血型的160份血液标本，梯度板法及试管法，正、反定型结果均相符，检测结果均正确。 　　2.2 试剂红细胞检测结果 ABO试剂红细胞、A2红细胞、A2B红细胞，应用梯度板法和试管法，分别进行ABO血型正定型，结果均正确。 　　2.3 无偿献血者血液标本检测结果 使用梯度板法对无偿献血者血液标本，分别进行ABO血型正、反定型，一次判定正确率为99.5%（20375/20477）。正、反定型结果不符标本，经试管法进一步检测，发现A2型3例，A2B型1例，AWB型1例，存在抗M不规则抗体标本1例。 　　2.4 室间质评活动结果 室间质评标本采用与无偿献血者血液标本相同的检测方案，均应用梯度板法进行ABO血型检测，检测结果正确，成绩均为100分。 　　3. 讨论 　　试管法是经典的血型实验方法，但由于采供血机构对无偿献血者进行ABO血型检测时，标本量大，试管法实验步骤繁琐，实验结果需人工登记而不能实现自动化，给实际工作带来一定的不便。 　　梯度板法是近年来从国外引进的一种极其灵敏的血型鉴定技术。但是该技术建立以来，一直未被广泛应用于大量人群的血型检测。梯度板为10times;12孔的V型微孔板，微孔呈阶梯状，阶梯的级宽和级高7～8mu;m，约相当于1个红细胞直径。当红细胞表面的抗原与相应的抗体结合，发生凝集反应时，凝块粘挂于阶梯上，均匀散在分布于孔底；无凝集反应发生时，红细胞呈游离状态，因红细胞的脂质双层膜像油样流体具有流动性[6]，使红细胞具备很强的柔韧性、变形性和可塑性，红细胞沿阶梯滑落，在孔底形成实心圆点。经Poseidon数字血型仪扫描读板、数码成像、数据处理后，判读ABO血型结果。 　　上述实验结果中，梯度板法对已知血型的血液标本及试剂红细胞的检测结果均正确，与试管法结果一致；室间质评