生物化学与分子生物学（南方医科大学）4.蛋白质的生物合成.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 翻译后加工和输送 第 四 节 Posttranslational Processing Protein Transportation * 肽链合成后的加工 多肽链折叠为天然的三维结构 肽链一级结构的修饰 高级结构修饰 * 一、多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质 肽链合成开始, 新生肽链的折叠即开始。 一级结构是空间构象的基础。 天然蛋白质折叠通常需要其他酶、蛋白辅助。 * 促进蛋白折叠功能的大分子 1. 分子伴侣 (molecular chaperon) 2. 蛋白二硫键异构酶 (protein disulfide isomerase, PDI) 3. 肽-脯氨酰顺反异构酶 (peptide prolyl cis-trans isomerase, PPI) * 分子伴侣 是一类保守蛋白质，可识别肽链的非天然构象。原核真核均有，类型多种，分多个家族，作用时需ATP供能。 不同分子伴侣功能不尽相同： 促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠或组装。 防止新生多肽链或待组装的蛋白亚基非正常聚集，避免形成无功能的结构（非正确折叠或组装的大分子结构对细胞通常是有害的） 帮助修复非正确折叠的蛋白质 参与蛋白质跨膜转运 辅助蛋白质的降解 伴侣素GroEL/GroES系统促进蛋白质折叠过程 * 二、一级结构的修饰 （一）肽链N端的修饰 （二）个别氨基酸的修饰 （三）多肽链的水解修饰 * （一）肽链N端的修饰 大多天然蛋白质不以甲硫氨酸为N端第一位氨基酸 脱甲酰基酶或氨基肽酶可以除去N-甲酰基、N端甲硫氨酸或N端附加序列。 约50%的真核蛋白质会有N-端氨基酸的乙酰化 * （二）个别氨基酸的修饰 某些蛋白质肽链中存在共价修饰氨基酸残基 糖基化 羟基化 乙酰化 甲基化 磷酸化 羧基化 二硫键生成 亲脂性修饰 * （三）多肽链的水解修饰 某些无活性的蛋白前体可经蛋白酶水解，生成活性的蛋白质、多肽，如胰岛素原酶解成胰岛素。 真核细胞某些大分子多肽前体，经水解生成数种小分子活性肽。 前胰岛素原加工成为有活性的胰岛素 前导序列的切除 二硫键的生成 C肽的切除 鸦片促黑皮质素原(POMC)的水解修饰 N C 信号肽 PMOC KR KR 103肽 ( ？) ACTH ?-LT ?-MSH ?-MSH Endophin * 三、高级结构的修饰 （一）亚基聚合 （二）辅基连接 * 蛋白质合成后需要经过复杂机制，定向输送到最终发挥生物功能的细胞靶部位，这一过程称为蛋白质的靶向输送。 四、蛋白质合成后的靶向输送 蛋白质的靶向输送(protein targeting) * 所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号，主要为N末端特异氨基酸序列，可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位，这一序列称为信号序列 。 信号序列 (signal sequence) * （一）分泌蛋白的靶向输送 真核细胞分泌蛋白等前体合成后靶向输送过程首先要进入内质网。 信号肽(signal peptide) ： 未成熟蛋白质中可被细胞转运系统识别的特征性氨基酸序列，一般由10~40多个氨基酸残基组成。 信号肽的一级结构 信号肽引导真核分泌蛋白进入内质网 * 蛋白质生物合成的干扰和抑制Interference Inhibition of Protein Biosynthesis 第 五 节 * 一、抗生素类 抗生素 作用点 作用原理 应用 四环素族（金霉素 新霉素、土霉素） 链霉素、卡那霉素、新霉素 氯霉素、林可霉素 红霉素 梭链孢酸 放线菌酮 嘌呤霉素 原核核蛋白体小亚基 原核核蛋白体小亚基 原核核蛋白体大亚基 原核核蛋白体大亚基 原核核蛋白体大亚基 真核核蛋白体大亚基 真核、原核核蛋白体 抑制氨基酰-tRNA与小亚基结合 改变构象引起读码错误、抑制起始 抑制转肽酶、阻断延长 抑制转肽酶、妨碍转位 与EFG-GTP结合，抑制肽链延长 抑制转肽酶、阻断延长 氨基酰-tRNA类似物，进位后引起未成熟肽链脱落 抗菌药 抗菌药 抗菌药 抗菌药 抗菌药 医学研究 抗肿瘤药 抗生素抑制蛋白质生物合成的原理 嘌呤霉素作用示意图 * 二、其他干扰蛋白质生物合成的物质 毒素(toxin) 在肽链延长阶段阻断蛋白质合成 干扰素(interferon) 真核细胞感染病毒后能分泌一类有抗病毒作用的蛋白质 白喉毒素(diphtheria toxin)的作用机理 白喉毒素 + + 延长因子-2 （有活性） 延长因子-