冬虫夏草无性型—中国被毛孢固态发酵条件的初步研究.pdfVIP

第26卷第 3期 生 物 学 杂 志 V01．26 No．3 2009年 6月 JOURNALOFBIOLOGY Jun，2009 doi：10．3969／j．issn．1008-9632．2009．03．022 冬虫夏草无性型一中国被毛孢固态发酵条件的初步研究 葛 飞 ，桂 琳。，李春如 ，樊美珍 (1．安徽农业大学微生物防治安徽省重点实验室，合肥 230036；2．安徽工程科技学院生物与化学工程系， 芜湖 241000；3．皖南医学院微生物和免疫学教研室，芜湖 241001) 摘 要 ：采用以麦角甾醇含量为指标 间接测定固态发酵产物生物量 的方法 ，对冬虫夏草无性型一 中国被毛孢的固 态发酵条件进行了研究。正交试验结果表明固态发酵最佳培养基组成为：大米5g，玉米粉2g，蚕蛹粉 1g，麸皮2g； 单因素试验结果表明：3-培养温度2Occ、料水比l：1．5、料层厚度2cm、无光照时对菌体生长较为有利。发酵条件 优化后，菌丝体中麦角甾醇的含量可达0．5911mg／g，比优化前提高了38．6％。 关键词：冬虫夏草；中国被毛孢；固态发酵；培养基配方 中图分类号：Q939．93 文献标识码：A 文章编号：1008—9632(2009)o3—0022—04 冬虫夏草 Cordycepssinensis(Berk．)Sacc．是我国 上 ，确定了生物量测定方法后 ，采用 以麦角 甾醇含量为 传统名贵中药，与人参、鹿茸齐名 ，具有多种药理作 指标间接测定同态发酵产物生物量的方法，研究了中 用 “。基于冬虫夏草的多种医疗作用，使得其需求 国被毛孢同态发酵的培养基配方 、培养条件，以求简化 量逐年增加，野生资源难以满足市场需求，因此进行冬 生产丁艺，提高产量 ，降低生产成本，并为固态发酵菌 虫夏草的人工培养成为解决这一难题的重要途径之 丝体相关产品的开发提供科学依据。 一 。 人工发酵冬虫夏草的首要难关就是菌种 问题，经 I 材料和方法 数名研究者通过多种方法证 实中国被毛孢 Hirsutella 1．1 材料 sinensisX．J．Liu，GuoY．L．，Y．X．YuW．Zeng为 1．1．1 供试 菌种 冬虫夏草无性 型 中国被毛孢 合格发表的冬虫夏草的无性型 ’。 RCEF0273菌株南安徽农业大学微生物防治安徽省重 中国被毛孢多采用液态深层发酵技术 ，但液 点实验室提供。 态发酵存在工艺复杂，T序繁多，容易污染，设备投资 1．1．2 主要仪器和试剂 人工气候箱 (LRH-250． 大等缺点；而固态发酵采用的原料一般是廉价的农副 GS)；电子天平 (METTLERAE200)；麦角甾醇购 自美 产品，设备也较液体发酵简单 ，同时同态发酵无废液排 国Sigma公司；高效液相色谱仪 (YOUNGLIN)。 放，不存在污染环境的问题 ，既节省了排污设备的费 1．2 方法 用 ，又提高了发酵产物的质量，生产成本大大低于液体 1．2．1 罐头瓶固态发酵 固态发酵培养基原料与水 发酵，并且固态发酵的后处理相对简单 ，菌丝体仅需干 搅拌均匀后，121℃灭菌40min，降至室温后接种，放置 燥粉碎即可，因此中国被毛孢固态发酵技术受到了人 于培养箱中静置培养。至菌丝长透后，停止发酵。根 们的重视和深入研究 ”。目前国内外有关冬虫夏 据其它虫草无性型菌株的经验配方，设置了10种中国 草无性型菌株的周态发酵研究鲜有报道。 被毛孢固态发酵的培养基配方，如表 1所示。 麦角甾醇是真菌细胞膜的成分，在细胞膜中的含 1．2．2 培养基配比的正交试验 为综合确定培养基 量较为稳定，而且它在代谢上也比