空间环境对草地早熟禾叶片解剖结构及过氧化物酶和酯酶同工酶的影响研究.pdfVIP

2003证 林业科技管理 增刊 空间环境对草地早熟禾叶片解剖结构 及过氧化物酶和酯酶同工酶的影响+ 韩蕾。郭燕。李银凤。孙振元。彭镇华。 (①·p国林科院林业所北京100091；②华中农业大学1 子，地面种植后利用表观变化初步筛选并通过营养扩繁出突变株系PMt、PM2和PM3。观察空间环境对草 地早熟禾植株叶片解剖结构及过氧化物酶同工酶和酯酶同工酶的的影响。结果表明，与CK相比，三个变 异株系由于细胞数目的增加使叶片宽度明显增加；叶肉细胞平均直径降低使叶片厚度减少；PM2、P3株系 叶片泡状细胞的增多，改变了叶片的形态。过氧化物酶同工酶分析结果表明，CK有11条谱带，迁移率为 有20条谱带，迁移率为2．78～6389。酯酶同工酶分析结果表明，CK有3条谱带，迁移率为59．74～94．81； PMl有8条谱带，迁移率为38．96～94．81iPM2有7条谱带，迁移率为48．05～94．81；PM3有8条谱带， 迁移率为49 生了较大变化：分别出现了CK中没有的谱带和在CK中存在而三个变异株系没有的谱带。同时各谱带的 强弱也发生了不同程度的变化。上述三个变异株系在生产应用和遗传育种上均具有较高的价值。 关键词空间环境草地早熟禾解剖结构过氧化物酶酯酶同工酶 航天技术和太空搭载实验开辟了生物育种的新途径。在空间高真空、微重力、强辐射和超洁净 的条件下，生物生理生化和遗传特性都会发生不同程度的变化。中国的空间诱变育种工作居于世界 领先地位，目前已经先后将500多种植物材料送入太空。但是在草坪植物中尚未见报道。研究空间 诱变育种培育优质抗逆草坪植物新品种，对于城市绿化和改良西部恶劣的生态环境具有积极意义。 本研究利用“神舟”三号(SZ一3)飞船搭载草地早熟禾(Poa 种子，地面种植后，筛选出了突变株系。通过其植株叶片解剖结构的变化观察，比较过氧化物酶同 工酶、酯酶同工酶的变化，力图解释空间诱变机理。 1材料与方法 1．1材料草地早熟禾(Poa 材料种植于中国林科院试验温室。 成苗1293株。通过形态观察筛选出三个与对照植株具有明显不同的植株。其一为生长快速，叶片明 株嵌合体突变，从植株基部萌出三个具有绿色和白色相间条纹叶片的分蘖(PM3)。并通过营养繁殖成 为株系后进行以下研究。 基金项目：优质抗逆草坪草早熟采等新品种选育(国家863计划，2002AA241061) 2003年 林业科技管理 增刊 1．2．1叶片解剖观察分别取各植株的第一片展开叶，在距叶尖三分之一处横切成长约4ram小段。 侵入FAA固定液24h后，参照《生物学显微技术》中石蜡切片的制作方法将材料制成永久制片，在 LEICAl00显微镜下观察摄影，并利用纤维长度测定仪(日本赠送)测量各变异株系叶片宽、叶片厚、 表皮细胞平均直径及叶肉细胞平均直径。 1．2．2 过氧化物酶同工酶分析采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分析过氧化物酶同工酶。取新鲜 型稳压电泳仪，垂直胶规格为10x13cm，胶厚1．5mm，采用不连续系统电泳，分离胶浓度7％，浓缩 历时4～5h，在40c冰箱中进行。最后采用联苯胺试剂进行染色，待出现清晰谱带后及时照相，测 定各谱带位置并计算迁移率(Rf)。 1．2．3酯酶同工酶分析电泳方法同过氧化物酶同工酶，染色采用n，争醋酸萘酚试剂，待出现清 晰谱带后及时照相，测量各谱带位置并计算迁移率(Rf)。 2结果与分析 2．1 各变异檀株叶片解剖结构观察空间环境对草地早熟禾叶片解剖结构影响较大。图1分别为 泡状细胞，而PM2和PM3的叶片在主脉和细脉处均有异常增大的表皮细胞，即泡状细胞存在。泡状 细胞是禾本科植物叶片上表皮所具有的一种特殊结构，是这类植物最大的旱生特性。当水分供应不 足时，泡状细胞首先失水收缩，使叶片卷曲成筒状以减少蒸腾作用；当有水分供应时，细胞充水， 使叶片展平，故泡状细胞又称为运动细胞。研究认为，泡状细胞参与叶片的内卷和折叠运动，与叶 片展开角度密切相关。 图1．空间环境对草地早熟禾叶片形态的影晌