花生赤霉素2-氧化酶基因的克隆和表达研讨.pdfVIP

山东 农 业 科 学 2013，45(1)：14～18，24 ShandongAgriculturalSciences 花生赤霉素2一氧化酶基因的克隆和表达研究 王成祥 ，李长生 ，侯 蕾 ，刘学英。，安 静 ，万书波 ，毕玉平 ，王兴军 (1．山东师范大学生命科学学院，山东 济南 250014； 2．山东省农业科学院高新技术研究中心／山东省作物遗传育种与栽培生理重点实验室，山东 济南 250100； 3．山东科技大学泰安校区，山东 泰安 271019) 摘 要：赤霉素2一氧化酶 (GA2ox)是赤霉素合成过程中起负调控作用的一种关键酶，催化有活性的赤 霉素生成无活性的赤霉素。从花生荚果发育不同时期的转录组序列中筛选到 GA2ox的基因片段 ，采用5一 RACE方法克隆了花生GA2ox基因的全长cDNA序列。序列分析表明，花生GA2ox蛋白氨基酸序列含有和其 他植物同样保守的结构域。通过 qRT—PCR技术对 GA2ox基因在花生不同组织器官中的表达分析 ，发现所检 测的1O种组织中均有 GA2ox的表达，其中成年叶片中表达最丰富 ，根、刚入土的果针次之。本研究结果为进 一 步分析该基因在花生生长发育过程中的作用提供了有用信息。 关键词 ：花生；赤霉素 ；赤霉素2一氧化酶；基因表达 中图分类号：Q785 文献标识号 ：A 文章编号：1001-4942(2013)o1-0014—05 CloningandExpressionAnalysisofGibberellin2——OxidaseGene from Peanut(ArachishypogaeaL．) WangChengXiang’，LiChangSheng，HouLei，LiuXueYing，AnJing’， WanShuBo，BiYuPing，WangXingJun’ (1．CollegeofLifeScience，ShandongNormalUniversity，Jinan250014，China； 2．High—TechResearchCenter／ShandongProvincialKeyLaboratoryofCropGenetwImprovement，Ecology andPhysiology， 船n250100，China；3．ShandongUniversityofScienceand TechnologyatTaian，Taian271019，China) Abstract Gibberellin2一oxidase(GA2ox)isakeyenzymeconvertingbioactivegibberellinstononac— tivegibberellinsduringgibberellinbiosynthesis．TheGA2oxfragmentwasidentifiedfrom transcriptomese。 quences，anditsfulllengthcDNA wasacquiredbyRACE amplification．Thesequencealignmentshowedthat theaminoacidsequenceofpeanutGA2oxcontainedthesameconserveddomainsasthatfrom otherplantspe cies．ThequantitativeRT—PCRresultsshowedthatAhGA2oxwasexpressed inallthe10examinedtissues； thehighestexpressionlevelwasdetectedinleaves，andthatinrootandpegswassecond．Thisstudyprovided usefulinformationforfurtherresearchofthefunctionsofthisgeneduringpeanutgrowthanddevelopment． Keywords ArachishypogaeaL．；Gibberellins；Gibberellins2一oxidase；