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专题九__选修3__第1讲__基因工程与细胞工程
基因工程是当前生命科学研究的热点和前沿之一,基因诊断、基因治疗、基因产品在人们生活中的出现日渐频繁。基因工程的原理、技术与应用是选修3的重要考点,且经常与胚胎工程、微生物的培养、克隆技术、组织培养等知识进行综合考查。动物细胞培养及应用、植物组织培养与植物体细胞杂交在农业生产中的应用也是重要的考点。; (1)纵向联系,系统复习。结合基因的结构与功能、细胞结构、生态系统等内容,全面系统地复习基因工程、细胞工程及生态工程等内容。
(2)运用比较法,避免认识误区。选修3中易混的基本概念较多,建议用比较法区分两种有关联或具有某方面的相似特征以及容易混淆的概念和原理,这样有助于使基本概念、原理清晰化;突出专有名词和术语的合理使用,避免张冠李戴,生搬硬套。;考点一;1.基因操作的工具;;2.基因工程的基本操作程序
(1)获取目的基因的方法
①从基因文库中获取;
②利用 PCR (聚合酶链式反应)技术扩增目的基因;
③人工合成。
(2)基因表达载体的构建(基因工程的核心)
①构建目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用;;②一个基因表达载体的组成:目的基因、启动子、终止子、标记基因等。
③构建方法
;(4)目的基因的检测与鉴定
;考点二;2.(2010·江苏高考)明党参是我国珍稀药用植物,对其进行保
护性开发利用的方法有(多选) ( )
A.设计细胞培养反应器,实现药用成分的工厂化生产
B.大量培养愈伤组织,直接提取药用成分
C.大规模栽培组织培养苗,获取药用成分
D.利用组织培养获得胚状体,制成人工种子;[解析] 本题考查植物细胞培养的实际应用知识,意在考查对该知识点的理解能力。对于珍稀植物的保护性开发利用,可借助植物组织培养技术。植物组织培养可通过大量培养愈伤组织,并设计细胞反应器实现其药用成分的工厂化生产并从中提取药用成分;也可通过培育试管苗或人工种子进行扩大培养进而对其实现快速繁殖。;1.植物组织培养和动物细胞培养的区别;项目;项目;2.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
;;;[特别提示] 在诱导剂的作用下进行细胞融合,形成的杂种细胞有三种:AA型、BB 型和 AB 型,只有 AB 型才是我们所需的杂种细胞,因此需要用选择培养基进行筛选。
;考向一;[例1] (2010·天津高考)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamH Ⅰ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。;据图回答:
(1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用________限制酶
同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的
大肠杆菌首先需要在含________的培养基上进行。
(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序
列是________(填字母代号)。
A.启动子 B.tetR
C.复制原点 D.ampR;(3)过程①可采用的操作方法是________(填字母代号)。
A.农杆菌转化 B.大肠杆菌转化
C.显微注射 D.细胞融合
(4)过程②采用的生物技术是________。
(5)对早期胚胎进行切割,经过程②可获得多个新个体。这
利用了细胞的________性。
(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达,可采用________(填字
母代号)技术。
A.核酸分子杂交 B.基因序列分析
C.抗原—抗体杂交 D.PCR
;[解析] 本题综合考查基因工程和胚胎工程的相关知识,同时考查利用所学原理解决实际问题的能力。
(1)Sam Ⅰ酶切位点在人乳铁蛋白基因内,如用其酶切,则会破坏目的基因,故排除。为防止目的基因和载体自身连接,在利用限制酶进行切割时,两端需要剪切成不同的黏性末端,因此需要用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。因人乳铁蛋白基因插入位置位于tetR四环素抗性基因内,因此该基因不能表达而导致受体细胞无四环素抗性;又因为载体上的ampR氨苄青霉素抗性基因未被破坏,所以受体;细胞具有氨苄青霉素抗性,故筛选含有重组载体的大肠杆菌需要在含氨苄青霉素的培养基上进行。(2)启动子位于基因的首端,可驱动基因转录出信使RNA,使基因得以表达,故属于调控序列。(3)①过程将目的基因导入到动
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