苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞株CyclinD1、Fas及凋亡的影响1.docVIP

精品论文 参考文献 苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞株CyclinD1、Fas及凋亡的影响1 高吉照1 薛天阳1 许伟1 郭雷1 李艳1 　　1徐州医学院附属医院儿科 江苏徐州 221002 　　摘要：目的 探讨苦参碱对人横纹肌肉瘤RD细胞株CyclinD1、Fas和凋亡的影响。方法 对数生长期的人横纹肌肉瘤RD细胞株，不同浓度苦参碱（0、0.5、1.0、1.5 mg/ml）分别作用48h后，RT-PCR法检测CyclinD1和Fas mRNA的表达，流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 RT-PCR结果显示，CyclinD1 /beta;-actin比值分别为0.59plusmn;0.06、0.35plusmn;0.05、0.27plusmn;0.02、0.05plusmn;0.01，各实验组与对照组比较、实验组两两比较差异均有统计学意义（P＜0.01）；Fas mRNA的表达：对照组及各实验组的灰度值分别为：0.322plusmn;0.020、0.393plusmn;0.025、0.516plusmn;0.404、0.707plusmn;0.252，各实验组与对照组比较、实验组两两比较差异均有统计学意义（Plt;0.05）；流式细胞仪检测对照组及各实验组细胞凋亡率分别为（3.61plusmn;0.212）%、（8.70plusmn;0.232）%、（17.26plusmn;0.120）%、（29.52plusmn;0.348）%。各实验组与对照组比较、实验组两两比较差异均有统计学意义（Plt;0.05）。结论 苦参碱能下调横纹肌肉瘤RD细胞的CyclinD1 mRNA，上调Fas mRNA，诱导横纹肌肉瘤RD细胞的凋亡。 　　关键词：苦参碱；横纹肌肉瘤；CyclinD1；Fas mRNA；细胞凋亡 　　ABSTRACT Objective Approach the effect of matrine on CyclinD1 and Fas of human 　　rhabdomyosarcoma RD cells.Methods Affter the human rhabdomyosarcoma RD cells line 　　treated with matrine of different concentrations（0、0.5、1.0、1.5 mg/ml）for 48 hours 　　respectively，the expressions of CyclinD1 and Fas mRNA were examined by RT-PCR，and cells apoptosis rates were examined by flow cytometry（FCM）. Results The results of RT-PCR showed that expressions of CyclinD1 mRNA were 0.59plusmn;0.06，0.35plusmn;0.05、0.27plusmn;0.02、0.05plusmn;0.01，respectively（P＜0.01），Fas mRNA were 0.322plusmn;0.020、0.393plusmn;0.025、0.516plusmn;0.404 and 0.707plusmn;0.252，respectively（P＜0.05）.The total apoptosis rates were（3.61plusmn;0.212）%、（8.70plusmn;0.232）%、（17.26plusmn;0.120）%、（29.52plusmn;0.348）%，respectively（P＜0.05）.Conclusion The CyclinD1 mRNA of RD cells is down- regulated，the Fas mRNA is up-regulated，and the apoptosis is induced by matrine. 　　Key words Matrine；Rhabdomyosarcoma；CyclinD1；Fas mRNA；Cell Apoptosis 　　近年来，苦参碱（Matrine）的抗肿瘤作用越来越引起国内外学者的关注，然而，苦参碱抗肿瘤作用的相关机制仍不清楚，我们通过苦参碱作用于儿童软组织肿瘤中最常见、恶性度高的人横纹肌肉瘤RD细胞株，来探讨苦参碱抗肿瘤的作用机制。 　　1 材 料 和 方 法 　　1.1 材料 人横纹肌肉瘤RD细胞株购自上海中科院细胞库，苦参碱购自陕西中鑫生物技术有限公司，总RNA提取试剂盒购自北京天根生化科技有限公司，细胞凋亡检测试剂盒购自上海碧云天生物公司，PT