荧光定量PCR检测HBV-DNA载量与HBV-M常见模式相关性探讨.docVIP

精品论文 参考文献 荧光定量PCR检测HBV-DNA载量与HBV-M常见模式相关性探讨 梁勇彪 区倩萍 蒙春华（南宁市第二人民医院检验科 广西南宁 530031）【摘要】目的：探讨荧光定量PCR检测HBV-DNA载量与乙肝病毒标志物常见模式的关系。方法：　回顾性分析同时检测乙型肝炎病毒和荧光定量PCR255例患者，统计HBV ndash; DNA检测含量值和酶联免疫吸附检测的HBV ndash; M模式值，进行对比。结果：　53例大三阳标本中, HBV ndash; DNA阳性47例平均拷贝数为2. 25times;107/ ml;在7例HBsAg、HBeAg 标志物阳性的标本中,HBV DNA 阳性5例,平均拷贝数5. 40times;106/ ml ;在57例小三阳标本中,HBV - DNA 阳性者为24例,平均拷贝数为7. 69times;10/ ml ;而在122 例HBV - M 标志物全阴性的标本中,仍有3 例检出HBV - DNA 阳性,平均拷贝数为4. 54 times;10/ ml。结论　在各种HBV 标志物模式中,以HBeAg 阳性者的病毒复制水平最高, 荧光定量PCR检测HBV-DNA载量可表达HBV感染和复制状态。 【关键词】HBV-DNA载量；荧光定量PCR；HBV ndash; M模式；标志物 【中图分类号】 R512【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2011）10-1477-02 中国有13 亿慢性乙型肝炎病毒( HBV) 感染者, 是传染性肝炎的高发地区。其中约有2000 万是需要抗病毒治疗的慢性进展性肝病患者［1］。目前HBVM模式感染复制情况难以判断, 实时荧光定量PCR 的应用, 使HBV- DNA 检测得到准确量化, 为临床医生对乙肝的诊断、治疗和预后判断提供可靠依据。为进一步了解HBV - DNA 定量检测与乙肝患者HBV 标志物( HBV - M) 之间的关系,对同步检测乙型肝炎病毒和荧光定量PCR 255份血清标本检测结果进行比较和分析如下。 1资料与方法 1.1 标本来源:255例标本均为两年来我院检测HBV-M，并同时做HBV-DNA检测的患者。 1.2 仪器与试剂: HBV-M: 仪器为RT-2100C 酶标仪(深圳雷杜)和洗板机（iwo-960 Autobio 安图）：HH.W21.600S型数显电热恒温水温箱和ZW-A型微量振荡器（金坛市科析仪器有限公司）, HBsAg试剂（上海科华生物工程股份有限公司）。HBV- DNA的检测仪：美国生产的ABI 7300 型实时荧光定量PCR 仪。试剂盒由广州中山医科大学达安基因诊断中心提供PCR HBV试剂盒。 1.3 检测方法: HBV-M采用ELISA法, HBV- DNA采用荧光定量PCR技术, 严格按试剂盒说明操作并执行质控。 1.4 统计学处理 采用 SPSS17.0 统计软件包进行数据处理。　两样本均数分析采用t 检验 , P lt; 0. 05 为差异有统计学意义。如表1。 2 结果 255例标本按HBV-M常见模式分为6个类型, 分别统计HBV- DNA检测阳性率及HBV- DNA含量, 进行结果统计时, 拷贝数lt;1000的标本不参加均值计算, 结果见表1。结果显示：255例HBV-DNA载量高于1000拷贝/ml血清的病例中有85例。表1　255乙型肝炎血清HBV-M模式与HBV DNA 定量结果的对比 3讨论 回顾性分析同步检测乙型肝炎病毒和荧光定量PCR255例患者，统计HBV ndash; DNA检测含量值和酶联免疫吸附检测的HBV ndash; M模式值， HBV - M 阳性133例; HBVDNA 阳性85例。其中53 例模式1血清标本中检测到HBV DNA 阳性48 例,检出率达90.57% ,模式2 中 HBVDNA 检出率为85.71%明显高于其它各组( P lt; 0. 05) , 显示HBV 复制与HBeAg 存在某种联系［2］ ; 但,HBeAg 阳性组60 例中仍有6例(10 %) HBV DNA 检测结果阴性,亦有可能与E系统检测的试剂质量有关［1］。在57例模式3中,有24 例检出HBV DNA ,检出率达42.11% ,据导这类乙肝阳性率差异较大,从13 %～63 %不等［3］ 。这可能与HBV DNA