银杏叶联合骨髓间充质干细胞降糖疗效观察.docVIP

精品论文 参考文献 银杏叶联合骨髓间充质干细胞降糖疗效观察 吉林大学中日联谊医院 130033 【摘 要】目的：银杏叶联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stems cells，BMSCs)对（I 型）糖尿病大鼠模型降糖疗效观察。方法：建立I 型糖尿病wistar 大鼠模型并随机分为糖尿病（DM）组、银杏叶（Ginkgo biloba L.extract EGB）组、EGB+BMSC组、BMSC 组，同时设置对照（Contral）组，其中EGB+BMSC 组经眼眶静脉输注骨髓间充质干细胞，并给予银杏叶提取物治疗，观察各组大鼠血糖、胰岛素、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、白介素6（IL-6）等指标变化。结果：EGB+BMSC 组的血糖、IL-6 水平显著低于EGB、BMSC 组（Plt;0.05），而胰岛素、SOD 及GSH-Px 水平较之升高（Plt;0.05）；结论：EGB 联合BMSC 治疗可显著降低糖尿病大鼠血糖水平，增加胰岛素分泌，减轻细胞炎症反应，为糖尿病治疗提供新的???法。 【关键词】骨髓间充质干细胞；银杏叶提取物；氧化应激 【中图分类号】R551.3【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2015）-09-021-02 既往研究［1］证明，糖尿病患者体内氧化应激水平较高，加重胰岛细胞的损伤；银杏叶提取物含抗氧化成分，可清除自由基，减弱氧化应激水平，减少内皮细胞的凋亡［2］。间充质干细胞是一种幼稚细胞，具有多向分化潜能，相关研究［3-4］通过其可塑性，将其诱导分化为胰岛细胞来降低血糖。但糖尿病患者机体内高氧化应激状态下的微环境，会加速移植干细胞的死亡［5］，为此，利用银杏叶抗氧化应激作用，联合骨髓间充质干细胞降糖成为一条可能的治疗途径。本实验将对二者联合降糖的疗效与单药治疗进行对比。 1.材料和方法 1.1 材料及方法 选取健康的wistar 成年雌性大鼠60 只，体重200~246g，购自吉林大学基础医学院动物实验中心。BMSCs 取自5 天的wistar 大鼠乳鼠股骨。STZ 购于大连美罗药厂。银杏叶提取物购自台湾济生化学制药厂股份有限公司。大鼠SOD 和GSH-Px 试剂盒购于南京建成生物公司。分别给予腹腔内注射STZ 配置液（STZ 粉末溶于枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液，配置成0.1mol/L，pH 值为4.3），剂量为55mg/kg.d-1，当大鼠尾静脉血糖值连续2 次gt;16.7mmol/L 时成功建模I 型糖尿病。将其随机分为EGB 组、DM 组、BMSCs 组以及EGB+BMSCs组。另选取10 只大鼠只注射等剂量的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液作对照。EGB 组每日给予0.8 ml　kg-1 的EGB；EGB+BMSCs组先给予等量的EGB 注射7 天，7 天后从眶下经脉输注1 10~6个BMSCs/只；BMSCs 组的大鼠则于第7 天直接从眶下静脉输注1 10~6 个BMSC/只；DM 组及对照组给予注射0.8ml　kg-1/只的生理盐水。 1.2 标本采集及指标测定：于第20 天处死大鼠，并取其静脉血留做标本，采用黄嘌呤氧化酶法测定血清SOD 含量，二硫代双硝基苯甲酸直接显色法测定血清GSH-Px 含量，ELISA方法测定血清IL-6 含量。 1.6 统计分析：符合正态分布的计量资料以均数plusmn;标准差（ x plusmn; s）表示，正态分布且方差齐的资料，采用单因素方差分析，组间比较采用SNK-q 检验，当Plt;0.05 为差异有统计学意义。 2.结果： 2.1 各组大鼠检测指标的测定比较 EGB+BMSC 组的血糖、IL-6 水平明显低于DM 组、EGB组、BMSC 组（Plt;0.05）；而胰岛素分泌水平、血清SOD、GSH-Px活性明显高于上述各组（Plt;0.05）；结果表明相比单独移植BMSC，联合EGB 可以帮助BMSC 减轻移植环境的氧化应激水平及炎症反应程度，进一步降低血糖水平、增加胰岛素分泌水平。见表1. 表1.各组大鼠检测指标比较（ x plusmn; s，n=5） 3.讨论： 美国内分泌医师协会在2004 年曾提出体内的氧化应激［6］是糖尿病及其并发症的共同发病机制。正常机体内存在氧化系统与抗氧化系统的动态平衡，而糖尿病的高血糖状态可通过葡萄糖的自身氧化、线粒体途径等使细胞内产生过多的O　　、过氧硝基自由基、活性氧簇（ROS），打破了这种平衡。由于缺乏内源性抗氧化代偿机制，使机