第11章 酶制剂生产.pptVIP

第11章 酶制剂生产 现代酶工艺开始于1874年。19世纪末开始利用麦芽糖化淀粉供酵母发酵酒精。1894年日本人高峰让吉利用米曲霉生产商品酶制剂高峰淀粉酶。1949年开始深层液体发酵进行细菌淀粉酶的生产，20世纪60年代日本利用淀粉酶和糖化酶制造葡萄糖。70年代利用葡萄糖异构酶将葡萄糖转化为果糖。20世纪80年代开始固定化酶和固定化细胞的第二代酶制剂。随着分子酶学，分子酶学工程的建立和发展，微生物酶的研究和应用将会有更大发展。 酶工程包括了酶的大规模生产、酶的分离提纯、酶的固定化技术、酶反应器设计和酶工业应用等多个方面。 目前，酶工程已成为生物技术五大体系（基因工程技术，细胞工程技术，酶工程技术，发酵工程技术和生化工程技术）中最活跃、发展最快、成效最大的一个体系。 11.1 概述 1．酶制剂工业化生产的优点 （1）酶的品种齐全，新酶种易得； （2）生产周期短，酶的产量大； （3）菌种易诱变，代谢易调控； （4）基因易操作，优质种易得。 2．酶制剂生产的一般工艺流程 微生物发酵法生产酶制剂有固态发酵法、液态发解法和载体发酵法。 11.2 微生物蛋白酶的生产 蛋白酶种类很多，按其降解多肽方式可分为内肽酶和端肽酶两类，后者又分为羧肽酶和氨肽酶。 目前蛋白酶的分类主要以产生菌的最适pH作为标准，将其划分为酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶三类。 早期蛋白酶主要从高等生物中提取。 目前工业用蛋白酶基本都来自微生物发酵。 2． 中性蛋白酶的生产 中性蛋白酶主要用于食品加工、二肽甜味剂等领域。 工业生产常用碳源有葡萄糖、玉米粉、淀粉、麸皮、米糠等，氮源主要有豆饼粉、鱼粉、血粉、玉米浆、酵母等。 （1）生产菌种：主要有枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、地曲霉、米曲霉、酱油曲霉留和灰色链霉菌等。 以放线菌166使用较为普遍，因其产生的中性蛋白酶分解蛋白质的能力比一般蛋白酶都要强，使用范围也非常广泛，它虽是胞外酶（胞外酶一般仅含内肽酶），但它几乎具有一切内肽酶与胞外酶的性质。 蛋白酶产生菌的培养过程如下：保藏菌种→斜面培养基→孢子→种子罐→发酵罐 （2）发酵 （3）提取 3．碱性蛋白酶的生产 碱性蛋白酶的产生菌较多，生产用菌株主要有芽孢杆菌属的的若干种、灰色链霉菌、费氏链霉菌。 斜面菌种培养 → 种子培养→发酵→提取 11.3 淀粉酶的生产 淀粉酶是一类能够水解淀粉质的酶的总称，是最早实现工业化生产、产量最大的一类酶制剂。 淀粉酶按照水解淀粉方式可分为四大类：α-淀粉酶、β-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶(糖化酶)和异淀粉酶(解枝酶)。