第4章 细胞培养技术制药.ppt

第四章　　细胞培养技术制药 ;第一节 动物细胞制药 ;一、动物细胞制药的基本原理 ;1. 用于蛋白药物生产的细胞系 ;2. 细胞的凋亡 ;最近，细胞凋亡在限制培养性能方面的影响才开始列入考虑范围 一般地讲，经受程序死亡的细胞都接受到了一个死亡刺激信号 信号转变成对细胞的程序性破坏 ;外界因素;剪切力是生物反应器环境中另一个导致细胞死亡的潜在原因，高强度的剪切力会导致坏死性细胞死亡，但较低强度剪切力的影响还不清楚 由于代谢压力而引起的细胞内环境的改变也会诱导细胞调亡，如在低pH的环境下，半胱氨酸蛋白酶（caspases）的激活过程更快 细胞间信号传递在源于培养的细胞凋亡中起重要作用，如细胞会释放自分泌因子，以响应密度、营养水品或受体介导的毒性代谢物的存在，一些能降低细胞间联系的生长因子抑制剂，如阿拉明可阻止细胞凋亡 ;3. 外源基因在哺乳动物细胞中的表达 ;1）表达用载体 ;2）DNA导入动物细胞常用的技术 ;3）DNA在细胞内的表达 ;二、转基因动物细胞生产的药物 ;重组血友病VIIa因子，治疗A型和B型血友病，BHK,1999年上市 IgG1和TNF受体融合，治疗风湿性关节炎，CHO，1999年上市 重组血凝因子IX，控制B型血友病病人的出血，CHO，1997年上市 ;第二节 转基因动物制药 ;首个转基因动物生产药物－ Atryn;一、产生重组蛋白的动物组织系统 ;二、转基因动物操作的原理和方法 ;1. 重组载体的构建 ;2. 转基因技术 ;3. 胚胎分割和核移植技术 ;第三节 植物细胞制药;一、研究概况 ;目前应用最多的是药用植物细胞的大规模培养，解决原料和保护环境 红豆杉，治疗乳腺癌和晚期卵巢癌效果较好 5β,20-环氧-1,2α,4,7β,10β,13α-六羟基紫杉烷-11-烯-9-酮-4,10-二乙酸酯-2-苯甲酸酯-13-[(2’R,3’S)-N-苯甲酰-3-苯基异丝氨酸酯 ;树皮中有万分之二左右的含量，每提取1公斤紫杉醇就要活剥10吨树皮 每提取１公斤紫杉醇约需要5万公斤红豆杉干枝叶 1995年野生红豆杉被列为国家一级保护植物 每克可以制成33克针剂，每支含紫杉醇大约30毫克 每支进口制剂1500元/支（“泰素”），国产800元／支（“紫素”）;二、药用植物大规模培养 ;植物快繁技术;三、植物转基因技术