铃铛刺抗逆相关DREBERF转录因子基因的克隆与鉴定.pdf

铃铛刺抗逆相关DREB／ERF转录因子基因的克隆与鉴定 摘 要 转录调控是植物应答逆境等一系列基因表达的最主要调控形式，其中DREB和ERF 类转录因子主要参与生物和(或)非生物胁迫的响应。本研究以新疆沙生植物铃铛刺为 材料，从中分离克隆新的DREB、ERF转录因子基因，以期为利用基因工程改良作物的 抗逆性提够优良候选基因，同时为豆科植物耐逆胁迫的分子机制研究和作物抗逆育种提 供理论基础。 本研究取得以下成果： HhERF2，登陆号为：EU872018和FJ032362。 2．半定量RT-PCR对2个基因的组织特异性表达情况进行了检测，结果在铃铛刺的 根、茎、叶中均有表达；胁迫应答检测结果显示，两个基因的表达均受干旱、高盐和低 温诱导，HhERF2还受茉莉酸甲酯的诱导。 列分析显示，mDRE口2不含内含子，HhERF2含有1个内含子。 糖苷酶活性分别为30．37U和49．26U，Whatman滤纸显色均能呈现明显蓝色。 5．构建绿色荧光蛋白融合表达载体，利用基因舱法转化洋葱表皮细胞的瞬时表达结 果显示，HhDREB2和HhERF2蛋白均定位于细胞核中。 的表达，增强了转基因拟南芥对干旱、高盐、低温及细菌的胁迫耐受性。 关键词： 铃铛刺，AP2／EREBP，酵母单杂交，亚细胞定位，转基因，逆境胁迫 IsolationandCharacterizationof FactorDREB／ERFGenes Transcription RelatedtoStressToieranceinHalimodendronhalodendronV Abstract controlisthemostvital ofthe in Transcription regulationways genesexpressedplants to factorsDREBandERFareinvolvedinthe of responsestress．Transcription response tobioticand／orabioticstress．Inthis novel DREBand organism study,twogenesencoding ERF factorswereisolatedfromsalttreecultivars．Theofthisresearch transcription purpose wasto candidatetoenhancetolerancetoadverse provide genes crop revealthemechanismofstresstolerancein and atheoreticalbasis leguminousplantprovide for tolerance． crop The resultswereachievedinthis following study： totheconservedoftheAP2／EREBPDNA domainsa 1．According regions binding pair of Was RT-PCRtwo were from degenerateprimersdesigned．Using fragmentsamplified leavesofsalttreecultivars．Twonove