酶学第一讲.ppt

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酶学第一讲

酶 学 Enzymology ;Discussion;课程内容;酶学的发展史 ;第一章 酶学基础 ;酶的化学本质 蛋白质,核酸(RNA) 酶作为生物催化剂具有的特性 1)效率更高:是非催化的108 —1020倍;是其他催化的107 —1013倍 2)高度专一性 3)易失活 4)易受调控 5)易受小分子的影响:辅酶、金属离子等;Practice;酶反应速度的影响因素 1.底物浓度 2.酶浓度 3.pH 4.温度 5.抑制剂 6.激活剂 ;底物浓度影响酶反应速度;酶浓度影响酶反应速度;pH影响酶反应速度;温度影响酶反应速度;抑制剂影响酶反应速度;可逆抑制作用;竞争性抑制曲线 ;非竞争性抑制曲线 ;反竞争性抑制曲线 ;激活剂影响酶反应速度;酶、酶学、酶工程;酶活力计算 中性蛋白酶的单位规定为在30℃和 pH7.0条件下,每分钟分解酪蛋白产生酪氨酸的微克数即为此酶的活力单位数。具体操作时,先取一定量的酶粉稀释液(稀释一定倍数),???入一定量的底物酪蛋白溶液,30℃水浴中保温 10分钟后,立即加入蛋白变性剂三氯醋酸,使酶变性失活,中止酶的活动。由于蛋白酶作用干酪蛋白后,有酪氨酸分解出来,酪氨酸和福林试剂作用后生成蓝色物质,根据颜色的深浅,用比色计测定后,知道有多少微克酪氨酸分解出来,从而计算出每克酶制剂在每一分钟内可分解出多少微克的酪氨酸,便是含多少单位。;作 业;称取25mg蛋白酶粉配制成25mL酶溶液,从中取出0.1mL酶液,以酪蛋白为底物,用Folin-酚比色法测定酶活力,得知1h产生1500mg酪氨酸。另取2mL酶液,用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2mg(蛋白质中氮的含量比较固定,为16%)。若以催化生成1mg/min酪氨酸的酶量为1个活力单位计算。根据以上数据求: a)1mL酶液中所含蛋白质量及活力单位; b)比活力; c)1g酶制剂的总蛋白含量及总活力。

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