rhoe在诱导人脑胶质细胞瘤凋亡中的研究word论文.docxVIP

主要缩略语英文索引英文缩写英文名称中文名称HBGHuman Brain Glioma人脑胶质瘤NF-κBNuclearfactor kappaB核因子κBFCMFlow Cytometry流式细胞术MTTMethyl thiazolyl tetrazolium噻唑蓝PIPropidiumIodide碘化丙啶CaspaseCysteine-containing aspartate-specific protease半胱天冬酶WBWestern blotting蛋白免疫印迹法ODOptical density光密度ELISAEnzyme-LinkImmunoSorbentAssay酶联免疫吸附法IκBNuclearfactor kappaBinhibitoryproteinNF-κB抑制蛋白MDCKMadin-DabyCanineKidneycells犬肾上皮细胞PCRPolymeraseChain Reaction聚合酶链反应TNFTumor necrosis factor肿瘤坏死因子GTPGuanosintriphoshate三磷酸鸟苷1RhoE 在诱导人脑胶质细胞瘤凋亡中的研究摘要目的：探讨RhoE在诱导胶质瘤细胞凋亡中的作用，为胶质瘤分子靶向治疗寻找新的靶点提供新方法。方法：采用westernblotting检测RhoE在人脑胶质瘤细胞系（人多形性恶性胶质瘤细胞-T98、人胶质母细胞瘤细胞-A172、人脑星形胶质母细胞瘤细胞-U87）中的表达水平；构建重组pcDNA3.1-RhoE真核表达载体，将质粒快速转染U87 细胞，采用四唑盐法检测细胞增殖能力的变化；Hoechst染色法观察细胞核的形态改变；流式细胞术检测细胞凋亡的情况；western blotting分析细胞Bcl-2、Bax 表达变化，以及capase-3 和NF-κB的活化水平。结果：1、RhoE蛋白在T98、A172和U87细胞系中表达明显低于正常人脑胶质细胞(P0.05)；2、上调RhoE 表达后，U87细胞增殖能力明显下降（P0.05），并且发生了显著的细胞凋亡改变(P 0.05)；3、上调RhoE表达后，westernbolt检测显示裂解的caspase-3水平增加、Bcl-2 表达水平下降、Bax的表达水平升高；4、上调RhoE 表达后，NF-κB亚单位p65在细胞核中的表达降低。结论：RhoE 分子可能在胶质瘤发生发展中起重要作用，上调RhoE 的表达水平能够有效抑制U87 细胞增殖和诱导细胞凋亡。RhoE 可能通过抑制NF-κB的活性，下调Bcl-2/Bax的比例，从而促进caspase-3 的活化，最后诱导U87细胞发生凋亡。RhoE 可能是胶质瘤发生发展中潜在的抑癌基因。关键词：胶质细胞瘤；RhoE；增殖；凋亡；NF-κB2AstudyonRhoE-inducedapoptosisinhumangliomacellsAbstractObjective:To evaluatetheroles ofRhoE in the courseof apoptosis of human gliomacells.Methods:Expression of RhoE in glioma cell lines(human polymorphism malignant glioma-T98、humanglioblastoma-A172、humanbrainstellatemothercell-U87)wasdetectedbywesternblotting;pcDNA3.1-RhoEwasgeneratedandtransiently transfectedintoU87cellline,methylthiazolyltetrazolium(MTT)assaywas performedtodeterminetheeffectonproliferation;HoechststainingandFlow cytometricanalysiswereusedtodetecttheeffectonapoptosis;westernblotting further assessedthechangeonproteinexpressionofBcl-2andBax,aswellasactivity of caspase-3 andNF-kB.Results:1、Comparedwithnormalhumanastrocytes,gliomacelllinessuchasT98,A172 and U87 cells all show low protein expression ofRhoE(P0.05).2、up-regulatingRhoEobviouslyinhibi