(新药药理学)特殊毒性试验.ppt

特殊毒性试验 广东医学院 叶 华 特殊毒性试验 狭义的特殊毒性试验：指遗传毒性试验、生殖毒性试验、致癌试验，即一般常说的“三致”试验 广义的特殊毒性试验：除“三致”试验以外，还包括依赖性试验、过敏性试验、局部刺激性试验、溶血性试验、免疫毒性试验、光敏试验、眼毒试验、耳毒试验等等 药物依赖性试验 药物依赖性是指药物长期与机体相互作用，使机体在生理机能、生化过程和/或形态学发生特异性、代偿性和适应性改变的特性，停止用药可导致机体的不适和/或心理上的渴求 药物依赖性 依赖性可分为躯体依赖性和精神依赖性 躯体依赖性主要是机体对长期使用依赖性药物所产生的一种适应状态，包括耐受性和停药后的戒断症状 精神依赖性是药物对中枢神经系统作用所产生的一种特殊的精神效应，表现为对药物的强烈渴求和强迫性觅药行为 身体依赖性试验 自然戒断试验：连续给予动物一段时间的受试药后，突然停药，观察动物出现的戒断症状，与同类的代表药物做对比，按照戒断症状和严重程度判断受试药的依赖性潜力 替代试验：给予动物各类代表药如吗啡、巴比妥钠等，使之产生身体依赖性后，停止给予代表药，以同样方式给予不同剂量受试药，观察记录动物替代期间戒断行为和体重变化 药物依赖性试验 催促试验：在短时间给予动物大剂量受试药，然后注射受体对抗剂观察和记录是否出现戒断症状及其严重程度。此法只适用于有竞争对抗剂的阿片类药物 诱导试验：大部分镇静催眠药无竞争性受体对抗剂，可采用诱导试验。通过应用各种诱发惊厥的方法，只采用阈下刺激强度，对正常动物不引起惊厥反应，对镇静催眠药产生依赖性的动物，在断药期间出现反跳性兴奋，原来的阈下刺激就可能诱发惊厥 药物依赖性试验 镇痛药：自然戒断/替代试验以及催促试验 镇静催眠药：自然戒断/替代试验以及诱导试验 精神依赖性实验 “自身给药”试验：测定静脉注射药物对动物的强化效应 动物：200~250g大鼠，雌雄各半 方法：行颈外静脉插管术，于特制的自身给药实验笼单笼饲养。对大鼠进行自身给药训练，直至大鼠建立自身给药（踏板）行为 刺激性、过敏性和溶血性 药物的刺激性、过敏性和溶血性是指药物经非口服途径给药，对用药局部产生的毒性（如刺激性和局部过敏性等）和/或对全身产生的毒性（如全身的过敏性和溶血性等) 临床前安全性评价的组成部分 刺激性试验 刺激性：非口服给药制剂给药后对给药部位产生的可逆性炎症反应 刺激性试验：观察动物的血管、肌肉、皮肤、粘膜等部位接触受试物后是否引起红肿、充血、渗出、变性或坏死等局部反应 在急毒、长毒试验中已经评价过相关的刺激性，其受试物与临床拟用的制剂相同或具有可比性，可不必单独进行刺激性试验 刺激性试验分类 皮肤刺激性试验 注射给药部位的刺激性试验 眼刺激性试验 其他途径给药部位刺激性试验 皮肤刺激性试验 经皮给药制剂及可能接触皮肤的非口服给药制剂应考虑进行皮肤刺激性试验 实验动物：首选家兔，也可选小型猪， ♀♂各半 设赋形剂对照，同体左右侧自身对比法 试验前24h脱毛处理，3x3cm2 给药方法：将受试物/赋形剂直接涂布于已去毛的皮肤，用二层纱布和一层玻璃纸覆盖，再以无刺激性胶布和绷带固定 贴敷时间至少4h 多次给药应连续在同一部位给药，期限一般不超过4w 皮肤刺激性试验 单次给药皮肤刺激试验，去除药物后30~60min、24、48和72h观察记录皮肤反应 多次给药皮肤刺激实验，每次去除药物后1h及再次贴敷前观察记录皮肤反应；末次贴敷去除药物后30~60min、24、48和72h观察记录皮肤反应 持久性损伤需延长观察期限以评价上述变化的恢复情况和时间，一般不超过14d 根据评分标准对皮肤反应进行评分，计算平均分值，评价受试物的刺激强度 中度及以上刺激需对给药局部进行组织病理学检查 注射给药部位刺激性试验 注射剂应考虑进行注射给药部位刺激性试验 首选家兔，可采用同体左右侧自身对比法 用药部位根据药物的给药途径确定 单次给药刺激性试验，在给药后48~96h对动物及注射部位进行观察；多次给药刺激性试验，每天给药前及末次给药后48~96h进行观察 观察期结束后对部分动物给药部位进行病理学检查。余下动物继续观察14~21d再进行病理学检查，以了解反应的可逆程度 眼刺激性试验 眼用药物及可能接触眼睛的受试物均应考虑进行眼刺激性试验 首选家兔，可采用同体左右侧自身对比法 试验前24h需检查动物双眼 每只眼睛滴入0.05~0.1ml或涂敷0.1g受试物 给药后1、2、4、24、48及72h进行眼部检查 持久性损伤需延长观察期限，一般不超过21d 采用裂隙灯进行眼部检查，记录眼部反应分值，判断刺激程度 皮肤光毒性试验 光毒性反应指药物吸收的紫外光能量在皮肤中释放导致皮肤损伤的作用，即皮肤或全身接触或应用化学物质后，继而暴露在紫外线照射下所引起的一种皮