《动物生物化学》课件14 RNA的生物合成-转录.pptVIP

本章主要内容 转录是基因表达的中心环节 转录涉及的酶与过程 转录后的加工 1 转录是基因表达的中心环节 转录是以 DNA为模板合成RNA, 并且只是以单股DNA 为模板，因此具有不对称性； 用以转录的单链DNA, 称为模板链, 与复制不同，转录是局部的,从启动子开始到终止子结束,为一个转录单位; 转录不需要引物； 转录的忠实性相对弱； 转录首先得到RNA前体，然后再进行加工转变为成熟的RNA. 分子量48万，5种亚基： 全酶= 核心酶（α2ββ’）+ σ因子 α亚基决定转录的基因 β亚基在5’——3’方向上延长多核苷酸链，其方式与DNA 聚合酶相同，原料为NTP，没有纠错的功能。 β’亚基结合DNA模板 σ因子识别“启动子”并与之结合 聚合酶I ：转录45S rRNA 聚合酶II：转录mRNA的前体(核不均RNA, hnRNA） 聚合酶III：转录tRNA 和5S rRNA 等 （注意： S） DNA上的转录起始序列，称为启动子，有序列保守性，不仅是转录起始的位置，而且影响转录的活性。 4.1 转录开始 由σ因子辨认并且结合到启动子上，局部解链（10-20bp），拓朴异构酶等也参与。 4.2 RNA链的延伸 由核心酶催化，以其中的一股DNA 单链作为模板链，以NTP为原料，按照碱基互补配对的原则，通常是由5’ppp嘌呤核苷（G 或A ）开头向着3’方向延长多核苷酸链，合成开始后，σ因子从模板上脱离下来（可以重复利用）。 核心酶覆盖双链DNA和RNA复合物，向前推进，一边解开螺旋，一边释放出新合成的RNA链，后面已经转录的区域中分开的DNA链又重新形成双螺旋。 A. 依赖ρ因子的终止 新生RNA上有ρ因子的识别位点。它与聚合酶-DNA-RNA复合物结合，向3’端移动，并解开DNA-RNA杂交体，需ATP。 B. 依赖于特定序列的终止 转录终止区有特殊结构。终止区的上游有GC二重对称区，转录的RNA容易形成多个“发卡”结构, 转录产物的3’端有polyU序列。这种特殊的二级结构阻止了转录向下游继续推进。 转录得到的只是RNA的初级产物，通常要经过加工，才能转变为成熟的RNA。tRNA 和rRNA的转录后加工比较简单. mRNA转录后的加工 原核生物的结构基因（编码的）是多顺反子（poly-cistron），通常是将几个相关的结构基因一起转录得到多个mRNA。 （顺反子cistron 一词可以视作基因的同义词）。 而真核基因是单顺反子（mono-cistron），其mRNA 的转录比较复杂, 因为真核通常只转录出一个结构基因,而且其结构基因通常又是断裂基因, 即是由编码的外显子（exon）和不编码的内含子（intron）间隔排开组成的。因此, 转录得到的仅仅是mRNA的“毛坯”，称为核不均RNA（hnRNA），要进行转录后的加工-----------在其5’端加上鸟嘌呤“帽子”，3’端加上polyA的“尾巴”，再切除内含子，将外显子拼接，才能成为一个成熟的mRNA。 * * 第14章 RNA的生物合成----转录RNA Biosynthesis----Transcription 转录（transcription） 以DNA为模板，在RNA聚合酶（RNA polymerase）的作用下合成mRNA，将遗传信息从DNA分子上转移到mRNA分子上，这一过程称为转录。 被转录成单个RNA分子的一段DNA 称为一个转录单位(transcript) 2 RNA聚合酶（ RNA polymerase ） 2.1 原核的RNA聚合酶 2.2 真核的RNA聚合酶 沉降系数 S 生物大分子在离心场中沉降，受到三种力的影响，它们是离心力，浮力和摩擦力。物质在单位离心力场下的沉降速度是个定值，称为沉降系数（sedimentation coefficient） 。 蛋白质、核酸等的沉降系数在1 X 10-13到 200 X 1