食品生物技术知识-发酵工程.ppt

pH值对菌生长和代谢产物形成的影响 pH影响酶的活性，当pH抑制菌体中某些酶活性时，会使菌体的新陈代谢受阻； pH影响微生物细胞膜所带电荷的状态，从而改变细胞膜的渗透性，影响微生物对营养物质的吸收及代谢产物的排泄，因此影响代谢的正常进行； pH影响培养基某些组分的和中间代谢产物的解离，从而影响微生物对这些物质的吸收，利用； pH不同，往往引起菌体代谢过程的不同，使代谢产物的比例发生改变。 pH影响细胞壁的结构和成分。 工业微生物菌种的扩大培养 培养基灭菌 空气灭菌 二、发酵基本工艺过程 发酵的流程 空气 空气净化处理 保藏菌种 斜面活化 扩大培养 种子罐 主发酵 碳源、氮源、无机盐等营养物质 灭菌 产物分离纯化 成品 工业发酵步骤和工艺流程 (1)用作培养菌种及扩大生产的发酵罐的培养基的配制； (2)培养基、发酵罐以及辅助设备的消毒灭菌； (3)将已培养好的有活性的纯菌株以一定量转接到发 酵 罐中； (4)将接种到发酵罐中的菌株控制在最适条件下生长并 形成代谢产物； (5) 将产物抽提并进行精制，以得到合格的产品； (6) 回收或处理发酵过程中产生的废物和废水。 菌种筛选 摇瓶试验 发酵罐试验 发酵原料的预处理 原料不同处理方法也有所差异。 1. 淀粉——利用前需变成糊精或葡萄糖 方法：酸水解（高压、耐酸）、酶水解法 2. 糖蜜——加热杀菌和用水冲稀，也可加酸处理后再补充无机盐 3. 碳氢化合物：石油脱蜡——一定馏分的石油经冷却脱蜡而获得的凝固点在-10℃的油，加入适量无机盐进行接种发酵 思考：在工业生产过程中常采用这种天然成分作为营养物质的液体培养基，这在发酵生产中有什么好处呢？ （1）液体培养基能使营养物质在发酵过程中得到充分的利用，还能为菌体提供更大的生存空间。同时，也有利于生产过程中培养条件的控制以及产物的提取。????（2）采用天然物质作营养物质既能满足菌体的营养需求，又能降低生产成本，还能减少对环境的污染。 菌种斜面培养 菌种：已有的优良生产菌种和选育的新菌种 方法：一般都是由保存于冷冻管及砂土管或冰箱中的斜面菌种开始，在正式使用前要先转接到新鲜斜面培养基上活化后，再用于种子扩大培养。 菌种的扩大培养 菌种细胞的生长活力强，移种至发酵罐后能迅速生长，迟缓期短； 生理性状稳定； 菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求； 无杂菌污染； 保持稳定的生产能力。 作为种子的准则是： 种 子 制 备 过 程 实验室种子制备阶段：琼脂斜面至固体培养基扩大培养（如茄子瓶斜面培养等或液体摇瓶培养); 生产车间种子制备阶段：种子罐扩大培养 种子质量的判断 由于菌种在种子罐中的培养时间较短，可供分析的参数较少，使种子的内在质量难以控制，为了保证各级种子移种前的质量，除了保证规定的培养条件外，在过程中还要定期取样测定一些参数以观察基质的代谢变化及菌丝形态是否正常。在生产中通常测定的参数为： 1)pH； 2)培养基灭菌后磷、糖、氨基氮的含量； 3)菌丝形态、菌丝浓度和培养液外观； 4)其他参数，如酶活力等。 种子质量的控制措施 菌种稳定性的检查 杂菌检查 培养基灭菌 杂菌的危害 1.使生物反应的基质或产物，因杂菌的消耗而损失，造成生产能力的下降； 2.杂菌也会产生代谢产物，这就使产物的提取更加困难，造成得率降低，产品质量下降； 3. 有些杂菌会分解产物，使生产失败； 4. 杂菌大量繁殖后，会改变反应液的pH值，使反应异常； 5. 如果发生噬菌体污染，生产菌细胞将被裂解，使生产失败。 培养基的分批灭菌法-连续灭菌法 分批灭菌 A.分批灭菌的操作 分批灭菌在所用的发酵罐中进行 B.分批灭菌的过程 a.升温阶段 b.冷却阶段 c.保温阶段 连续灭菌 将配制好的培养基在向发酵罐输送的同时加热、保温和冷却，进行灭菌。培养基连续灭菌过程中，蒸汽用量平稳，但蒸汽压力一般要求高于 5×l05Pa (表压)。 其具体流程如下： 预热 配制罐或预热罐中进行 ，使培养基的温度升到70℃左右； 加热 在加热器中，培养基与蒸汽混合，温度迅速上升到 130～140℃； 保温 培养基被加热到预定的灭菌温度后，进入保温设备(也称维持设备)中，经过一段时间的保温，使培养基中所含微生物全部杀灭； 冷却 利用喷淋冷却器、真空冷却器、板式冷却器、螺旋板冷却器、真空闪冷器等冷却没备降温。 连续灭菌与分批灭菌比较具有很多优点: 高温短时