比较正常前列腺、前列腺增生及前列腺癌组织中核转录因子nf-κb经典通路及选择性通路-泌尿外科学专业论文 word格式.docxVIP

中文摘要研究背景核因子ΚB蛋白家族通过经典通路和旁通路发挥各种作用，而目前这两种通路在前列腺癌中的作用尚不明确。目的我们为了探索出这两种通路在前列腺癌中的作用，分析比较了前列腺正常组织（癌旁组织）、前列腺增生组织(BPH)、前列腺癌组织（PCa）中的核因子ΚB经典通路和旁通路。方法首先，本文利用Oncomine平台下载了5 组前列腺癌数据集，同时利用Biocarta，我们列出了NF-kB信号通路的主要成员。对NF-kB信号通路的基因和下载的数据进行聚类分析。实时定量PCR方法测量PC3、DU145、LNCap、RWPE-1细胞NF-κB1和NF-κB2的基因表达水平；构建炎症模型，大鼠随机分为大肠杆菌组(n=6)和对照组(n=6)，，免疫组化的方法分析磷酸化P50（P-P50）和磷酸化P52（P-P52）蛋白的表达情况。前列腺组织分成3组：A组：PCa(n=68);B组：BPH（n=60）;C组：正常前列腺组织（n=15）。用实时定量PCR方法测量NF-κB1和NF-κB2的基因表达水平。用免疫组化染色的方法分析磷酸化P50（P-P50）和磷酸化P52（P-P52）蛋白的表达情况。最后结合患者临床病理特征分析两条通路和前列腺癌级别、分期及预后的关系。结果实时定量PCR方法测量发现NFKB1在DU145、LNCaP表达水平低于正常细胞（倍数变化分别为2.96倍及3.74倍，P0.05），PC3的表达同正常细胞无显著差异（P0.05）；然而，NFKB2在DU145、LNCaP表达水平高于正常细胞（倍数变化分别为11.86倍及14.78倍，P0.01），而NFKB2在PC3的表达同正常细胞无显著差异（P0.05）；炎症模型显示经典通路的P50激活，染色主要定位于细胞浆；与前列腺增生组织、正常前列腺组织相比，前列腺癌组织中的NF-κB1基因差异性地下调超过1.5倍，而NF-κB2基因差异性上调超过2倍；A组患者P-P50阳性的比例为26.5%，比B组（88.3%，p=0.005）和C组（100%，p=0.002）显著性降低，A组患者P-P52 阳性的比例为42.6%，比B组（11.7%，p=0.009）和C组（6.7%，p=0.008）显著性升高；比较A组中P52、P50免疫组化阳性和阴性患者的术后总体生存率，结果显示p-P52阳性和阴性患者术后总体生存率具有统计学意义的显著性差异，而p-P50则无统计学差异。p-P52阳性患者的预后更差（p=0.019），。结论我们的实验结果首次发现了NF-κB经典通路和旁通路在前列腺癌中的作用。P-P52可能作为前列腺癌预后的一个指标。关键词：免疫组化；核因子κB；预后；前列腺癌；适时定量PCRAbstractBackgroundNuclearfactor-κB(NF-κB)iscontrolledbytheclassicalandalternative NF-κBpathways,theroleofwhichinprostatecancer(PCa)isnotclearly defined.PurposeToprovidethismissingtranslationallink,wecomparedtheclassicaland alternativeNF-κBpathwaysinnormalprostate,benignprostatehyperplasia (BPH) and PCa.MethodsFirstofall,weusedOncomineplatformtodownload5groupsofdatason prostatecancer.andusedBiocartatolistalltheproteinsofNF-kBfamily.All genesinNF-kBfamilyanddatasdownloadedwereClusterAnalysed.Thegene expressionlevelsofNF-κB1andNF-κB2ofPC3、DU145、LNCap、RWPE-1cells weredeterminedbyreal-timequantitativeRT-PCR.Ratsweredividedintotwo groups:group colibacillus(n=6) and control group(n=6) and we set up inflammationmodels, we analyzed the expression and sub-cellular localizationofphosphorylatedP50(p-P50)andphosphorylatedP52(p-P52) proteinsbyimmunohistochemicalstaining