第九章 酶的应用-2.pptVIP

第十一章 酶的应用领域 第一节 酶在医药领域的应用 如由微生物、病毒等外来原因可起的疾病可利用抗生素、磺胺类药物去抑制微生物代谢必需的酶，导致微生物的死亡，从而使机体的功能恢复正常，而机体内部发生的疾病，往往由于酶的功能失调，这时必须把酶直接作为药物，补充酶的不足或调整酶的作用达到治疗的目的。特别对癌细胞内异常的生化环境，可用酶来破坏。 酶制剂常用品种及其性能 一．α-淀粉酶 1. 耐高温α-淀粉酶 2. 高效耐高温α-淀粉酶 3. 洗涤剂α-淀粉酶 4. 中温α-淀粉酶 由于酶的催化特点，使酶法检测具有快速，简便，正确灵敏等优点。它包括两方面：一是据体内原有酶活力的变化来诊断某些疾病；二是利用酶来测定体内某些物质的含量从而诊断某些疾病。 一、酶在疾病诊断方面应用： （3）转氨酶：测量血清中谷丙转氨酶（GDT）和谷草转氨酶（GOT）的活力测定，已在肝脏疾病和心肌梗塞等疾病的诊断中得到广泛应用，对于急性传染性肝炎患者GPT、GOT活力升高，正常GPT＜40 端粒酶是目前所知唯一携带RNA模板的逆转录酶，具有种属特异性，例如四膜虫的端粒酶，其RNA部分含159个核苷酸，其中有一段序列为5′-CAACCCCAA-3′可作为合成端粒DNA3′端GT 丰富序列-GGGGTT-模板。人端粒酶的RNA含450个碱基，其中-CUAACCCUAAC-为合成-AGGGTT-的模板。 真核生物线性染色体的两个末端称为端粒(telomere). 对端粒DNA序列的分析，发现端粒DNA的3′端是由数百个串联重复GT丰富的短的寡核苷酸序列，不同种类细胞的端粒重复单位不同，如四膜虫的重复序列为-GGGGTT-，人类端粒由5′TTAGGG3′的重复单位构成，长度在5～15kb范围。端粒和端粒结合蛋白组成核蛋白复合物，广泛存在于真核生物细胞中，具有特殊的功能。端粒DNA序列虽不含功能基因，但对维持染色体的稳定性起着重要作用。如果端粒丧失，染色体之间可能出现端-端融合、降解、重排乃至染色体丢失等变化，最后细胞衰亡。  端粒、端粒酶和细胞的衰老有密切关系。端粒的长度决定细胞的寿命，因此可用失去的端粒数来“计数”细胞分裂的次数，有人将端粒称为分子钟或有丝分裂钟。在人体正常细胞内(除生殖C和干C等以外)端粒酶不再具有活性，随着细胞不断分裂，端粒的长度越来越短，当达到一个临界长度，细胞染色体即失去稳定性，阻止细胞进一步分裂的信号便发出。细胞将发生凋亡（apoptosis）。但是恶性肿瘤细胞当端粒缩短到某种程度，端粒酶活性又重新出现，对端粒进行补偿，使之永不衰亡，形成恶性增殖。测定体细胞内端粒酶活性, 有助于对某些癌症作出诊断。  (二) 用酶测定体液中某些物质的变化诊断疾病 酶具有专一性, 催化效率高等特点, 可用酶作为检测试剂，测定体液中某些物质的变化来诊断疾病.(表11-2) 诊断用酶的产品必须达到一定的纯度。而粗酶制剂混杂了许多杂酶，其中有些杂酶可以影响检测结果。例如：脱氢酶制剂中不能混有NADH氧化酶,将影响NADH的读数. 酶法分析有两个目的：一是测定代谢物质浓度；二是测定酶浓度。要达到测定目的必须建立一个酶反应系统。在大多数情况下，酶反应系统必须包含两种酶和两个酶反应，才能达到测定目的。 酶试纸是将酶固定于纸片上，制成能够测定某些物质的含量的试纸。将葡萄糖氧化酶和过氧化物酶和邻联甲苯胺等还原性色素原固定在纸片上，制成检糖试纸，将其浸入待测溶液中，如果存在G，试纸则呈蓝色，根据试纸上蓝色的深浅，可判断G含量的多少。 1.用酶进行糖尿病的诊断 将检糖酶试纸侵入待测溶液中，如果存在葡萄糖，则试纸可呈现蓝色。根据试纸上蓝色的深浅，可以判断葡萄糖的多少，从而检测血液、尿液中葡萄糖的含量，作为诊断糖尿病和妊孕的临床指标。 尿液检测试纸可以同时检测尿液中葡萄糖、蛋白质、胆红素、亚硝酸盐、酮体、尿胆素原、隐血、PH等8个临床指标。其他还有乳糖试纸、过氧化氢试纸等。 检糖酶试纸: 葡萄糖氧化酶和过氧化物酶可以联合催化下列偶联反应： 葡萄糖氧化酶 葡萄糖 + O2 葡萄糖酸 + H2O2 过氧化物酶 H2O2 + DH2 2H2O + D （无色） （蓝色） 式中DH2为还原性色素原，一般为邻联甲苯胺、邻联茴香胺。它们本身无色，氧化后则变成蓝色化合物。 H2O2 + 4