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第一节 DNA的生物合成 （ DNA复制replication ） 一、DNA的复制 （一）DNA复制的基本原则 1、半保留复制 semiconservative replication 以亲代DNA双链为模板(template)，按照碱基配对规律，合成2个新的DNA分子，其核苷酸组成，排列顺序与亲代的DNA分子一模一样，而且子代还保留了一条亲代的多核苷酸链，称为半保留复制。 semiconservative replication Two parental strands of the DNA are separated,and each DNA strand serves as a template for the synthesis of a new complementary strand.Each of the two newly produced DNA molecules has one new strand and one old strand. The old strand in each daughter DNA comes from parental DNA. Interpreting the Data 2、复制起点和DNA的双向复制bidirectional replication DNA复制从DNA分子的特定部位开始， 此特定部位称为复制起始点origin of replication，ori 形成复制叉replication fork 3、半不连续复制 （二）参加复制过程有关的酶 （1）解链酶（helicase）： 解开双链碱基对（base pairs） （2）DNA拓扑异构酶（topoisomerase）： 水解连接磷酸二酯键、松弛超螺旋和双股螺旋（relax the supercoil and double helix） 拓扑酶Ⅰ：不需ATP切断一条链，松驰超螺旋再连接 拓扑酶Ⅱ：无ATP,切断两条链，松驰超螺旋再连接 有ATP,连接断端重新形成负超螺旋 （3）单链DNA结合蛋白（single strand DNA binding protein），阻止重新形成碱基对 拓扑酶Ⅰ:切1——旋（松）——接 拓扑酶Ⅱ：切2——旋（负）——接 (3)单链DNA结合蛋白（single stranded DNA-binding ① 维持单链状态，防止复性。 ② 对抗核酸酶水解，保护单链完整。 SSB可结合跨度为32个核苷酸单位，在DNA 解链中不断结合，脱离再结合。 2、引物酶（primase） 是一种RNA聚合酶，催化NTP合成小段RNA引物。 蛋白dnaB等，与引物酶结合形成引发体（primosome），并启动引物酶 3.DNA聚合酶（DNA指导的DNA聚合酶）DNA-dependent DNA polymerase DNA polymerase DNA聚合酶: In 1957, Arthur Kornberg (Stanford University) demonstrated the existence of a DNA polymerase - DNA polymerase I . DNA聚合酶的聚合作用 DNA的半不连续复制和冈崎片段 *聚合需引物，聚合有方向：5 ′→ 3 ′ *领头链(leading strand)：合成方向与复制叉前进方向一致的连续合成的DNA子链。 *随后链(lagging strand)：合成方向与复制叉前进方向相反的不连续合成的DNA子链。先形成冈崎片段(Okazaki fragment) 半不连续复制 3’ 5’ 复制的保真性（fidelity） DNA复制时保证遗传信息传代延续准确无误。 保真机理 〈1〉聚合酶依赖模板，在复制延长中对碱基有选择功能：遵守严格的碱基配对规律 〈2〉聚合时，磷酸二酯键的形成应在氢键的准确搭配之后发生 〈3〉复制中出错时有即时校读功能（有错即改）。 作用特点： ⑴以dATP、dCTP、dGTP、dTTP（dNTP）作底物；需要模板的指导；需要有 3`-OH结构的引物存在 ⑵DNA新链的延长方向：5 ′→ 3 ′ ⑶具3 `→ 5`核酸外切酶活性 ⑷具5`→ 3 ′核酸外切酶活性(DNA-pol I) ⑸具缺口填充能力 DNA连接酶(DNA ligase ) 　　连接碱基互补基础上的双链中的单链切口 二、逆转录 （reverse