大鼠肝微粒体温孵体系中(+)，(-)-黄皮酰胺及其代谢产物的LC-MS分析.docVIP

大鼠肝微粒体温孵体系中(+)，(-)-黄皮酰胺及其代谢产物的LC-MS分析 药物分析杂志 2000年第1期第20卷 研究论文 作者：姚庆强　王琰　杨树民　王慕邹 单位：姚庆强　王琰　王慕邹（中国医学科学院　中国协和医科大学药物研究所　北京　100050）；杨树民（中国兴奋剂检测中心，北京 100029） 关键词：(+)，(-)-黄皮酰胺　肝微粒体　体外代谢　高效液相色谱-质谱　电喷雾 　　摘　要：目的：建立黄皮酰胺及其代谢产物的HPLC-ESI-MS在线检测分析方法，并对未分离得到的微量代谢产物进行分析确证，探索LC-MS在代谢转化研究中的应用。方法：利用柱后补偿技术，采用正离子检测对大鼠肝微粒体中(+)，(-)-黄皮酰胺及其代谢产物进行HPLC-ESI-MS分析，根据MS的碎片信息检测主要的代谢产物，特别是对未分离得到的代谢产物的结构碎片进行分析，确定其结构。结果：除检测出主要已知代谢产物外，尚检测出一新的代谢产物，通过质谱碎片分析推断其结构为3-去氢黄皮酰胺，进一步完善了黄皮酰胺的代谢途径。结论：LC-MS用于代谢转化的研究，方便快速，为该技术在代谢转化中的应用提供了一种参考。 LC-MS Analysis of (+) and (-)-Clausenamide 　　and Their Metabolites in Rat Liver Microsomes Yao Qingqiang　Wang Yan　Wang Muzou 　　（Institute of materia medica,Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College,Beijing　100050） 　　Yang Shumin 　　（China Doping Control Center,Beijing 100029） 　　Abstract：Objectives：The HPLC-ESI-MS on line analytical method was developed for the determination of the minute metabolites of (+) and (-)-clausenamide after incubation with rat liver microsomes.Methods:The HPLC-MS analysis of (+) and (-)-clausenamide and their metabolites was used with post-column modification and positive polarity.The structures of the metabolites were analyzed by their MS data.Results:Besides the main known metabolites,an unknown metabolite,3-dehydroclausenamide was determined.Conclusion:The metabolic pathway of clausenamide was complemented by this research and the LC-MS method is a very useful method in the research of drug metabolism. 　　Key words：(+) and (-)-clausenamide,liver microsome,metabolism in vitro,high performance liquid chromatography-mass spectrometry,electrospray ionization▲ 　　黄皮酰胺是芸香科黄皮属植物黄皮Clausena lansium(Lour.)Skeels叶水浸膏中分离得到的有效成分［1］，经不对称合成和拆分得到左旋和右旋黄皮酰胺［2］，其中左旋体有较好的促智作用，右旋体作用不明显且有较强的毒性［3，4］，其化学结构见图1。图1　(-)和(+)-黄皮酰胺的结构 　　我们曾报道了左旋及右旋黄皮酰胺在大鼠肝微粒体中的代谢转化［5，6］，分离纯化了6个代谢产物，通过1H-NMR，FAB-MS，EI-MS鉴定其结构分别为：6-羟基-(CM1)，5-羟基-(CM2)，4-羟基-(CM3)，4，6-二羟基-(CM4)，4-苯环邻位-羟基-(CM5)，4，7-苯环间位-二羟基-(CM6)黄皮酰胺。为进一步寻找未分离得到的代谢产物，并拟探索液相色谱-质谱联用技术在代谢转化研究中的应用，本文对黄皮酰胺及其代谢产物进行了