无菌操作规程-实验室.ppt

无菌技术操作 王孟军 2009-2-10 无菌技术操作综述 无菌技术是保证无菌状态的操作技术。 无菌操作技术不仅仅是在无菌的条件下打开你的培养物，而是要当作一项实验中经常考虑和实际操作的技术，这样做才能保证实验中的每项工作都会受益。利用无菌技术配置RNA缓冲液、做限制性酶切反应及制备膜蛋白等。当你习惯了无菌操作后，同样可以进行放射性同位素或生物危害品的实验。 无菌技术操作综述 空气中布满了各种灰尘、孢子、细菌，应当尽力避免它们掉入你的试剂或者培养好的菌液中。微生物可能会从你的手上或者是袖子上掉下来。手臂的挥动、快速的吹打以及有人走过都可能扬起那些未知的污染物。 无菌技术操作综述 使用无菌操作技术将使你实验污染的机会减到最小，虽然不可能在所有的情况下都保证绝对的安全，避免所有的污染，但是你的实验技术越好越熟练，污染的概率越低。 无菌技术操作规则 工作区域尽可能的远离通风口和交通口。不应该开窗工作、也不要靠近门口。通风厨能够帮助无菌状态的保持，但它也不一定。 保证整洁的工作环境。拿走所有与本次实验无关的物品，台面上只存放与本次实验有关的物品。 无菌技术操作规则 实验前要用消毒剂或是清洁剂清洁工作区域。70%的乙醇是最常用的（但是要根据不同的实验室情况而定，因为酒精不一定对所有的污染物有效），在每次实验之前和结束之后都要用70%的乙醇清洁实验台面。 无菌技术操作规则 工作区间内尽量减少手臂的运动。把所用的实验工作或是仪器尽可能放在手边，左手用的放在左边，右手用的放在右边。例如：一个右手工作者要从一个试剂瓶中吸取微量的液体，那么枪、枪头都应放在右手边，而试剂瓶应该放在左手边。 无菌技术操作规则 把所有可能用到的东西都准备好。这样做可以保证实验过程中不会因为缺少某种物品而不得不离开实验区域，人的走动很容易扬起灰尘，而且使人不能集中精神。 无菌技术操作规则 保证操作中所用到的枪头都必须是无菌的。如果你的无菌操作技能还不是很熟练时或者进行重要实验时，所有打开过的枪头盒内的枪头最好不要再使用，哪怕是在无菌条件下打开过的。 操作技巧 最小化： 距离，尽量将所需物品放在离手最近的地方。距离越近，移动越少。 移动，移动可以引起空气的流动。移动越快产生的流动越快，所以只能慢慢的做那些必要的动作。 操作技巧 最小化： 暴露，在空气中移动物品的时间越长，接触空气中微粒的概率则越大。瓶口在空气中的时间越长，掉落进去的空气中的微粒越多。灼烧一下瓶口或试管口，使颗粒固定在表面和制造一个向上的气流，都可以减少掉落颗粒的数量。注意：灼烧不是为了灭菌，只需要在火焰上燎1-3秒即可。 操作技巧 保持溶剂瓶与操作台面成大约45度角时打开盖子。这样可以尽量减少空气的污染以及在移液时产生最少的气溶胶。 如果必须取下盖子，那么要把它倒放在干净的台面上。而且应确保你的手或者手臂不要从上方经过。 无菌操作中的一些错误 要使用带滤膜的枪头吸取菌液。在操作不同菌株时所产生的气溶胶甚至是菌液可能会反弹到枪口上，导致正在操作的菌种间相互污染。 当枪头接触到试剂瓶外侧、底部或枪头盒外壁等其他固体物时，弃掉枪头。  谢 谢 大 家 * * 无菌操作中的一些错误 那些已经破旧的枪头盒子应该定期更换。 灭过菌的枪头必须完全烘干后再储存到自己的柜子里，枪头处于潮湿状态时更容易被空气污染。