利用层层自组装技术制备表面带有生物反应位点荧光微球-preparation of fluorescent microspheres with biological reaction sites on their surfaces by layer-by-layer self-assembly technology.docxVIP

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2018-05-29 发布于上海
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利用层层自组装技术制备表面带有生物反应位点荧光微球-preparation of fluorescent microspheres with biological reaction sites on their surfaces by layer-by-layer self-assembly technology

利用层层自组装技术制备表面带有生物反应位点的荧光微球中文摘要利用层层自组装技术制备表面带有生物反应位点的荧光微球中文摘要荧光微球被广泛应用于生物医用检测等领域,但是产量有限且价格昂贵,因此寻求简单有效的制备方法具有很好现实意义。聚对亚苯基亚乙烯（PPV）这一荧光共轭聚合物有着制备简单、光稳定性好等优点。同时其前驱体（pre-PPV）带有正电荷，可以使用静电吸附作为驱动力来沉积包覆到带负电荷的基质微球表面。本论文采用层层自组装技术，分别制备了以 PPV 作为荧光发射种的带有交联层的荧光微球和带有聚合物胶束粒子隔层的荧光微球，并对它们的荧光性能和稳定性能进行了探究。论文具体内容包括以下两个方面：（1）制备表面带有生物反应位点的交联荧光微球首先用典型的 Wessling 锍盐前驱体法合成带正电荷的聚对亚苯基亚乙烯前驱体（pre-PPV），并通过静电作用将其包覆到带负电荷的基质微球—聚苯乙烯二乙烯苯共聚微球(SPSDVB)上。然后再在微球表面交替沉积聚阴离子（苯乙烯磺酸钠（PSS）、聚丙烯酸（PAA））和聚阳离子（重氮树脂（DAR））。最后通过热处理步骤同时实现 pre-PPV 到 PPV 的转化，以及 DAR 与 PSS 及 PAA 的交联反应。在实验过程中，我们优化了 DAR 的浓度以及聚合物交替沉积的顺序，最终得到了交联荧光微球 SPSDVB-(PPV/PSS/DAR/PAA)。通过荧光显微镜，流式细胞仪等手段表征，这些微球具有明显的核壳结构，且尺寸均匀、有强烈稳定的荧光。通过耐溶剂性的实验探究，表明该微球即使在高离子浓度的离子解离剂中也有着良好的稳定性。同时该微球还具有良好的热稳定性和耐光性。在生物耦合实验中，该微球表现出很好的生物耦合性。这些优异的性能使得该交联荧光微球在流式细胞仪以及微流控装置中都有着很广阔的应用前景。（2）制备带有聚合物胶束粒子隔层的多层荧光微球中文摘要利用层层自组装技术制备表面带有生物反应位点的荧光微球首先我们用原子转移自由基聚合（ ATRP）的方法合成出两亲性嵌段聚合物PAA46-b-PS40，并将其自组装成形貌规整、大小均一，平均粒径在 80 nm 左右的聚合物胶束粒子。通过一系列实验我们优化了聚合物胶束粒子包覆微球时的浓度与 pH 值。最终成功得到了 SPSDVB-(PPV/PAA-b-PS)n 多层荧光微球。根据扫描电镜和激光共聚焦的表征结果显示，该微球表面的聚合物胶束粒子包覆均匀，荧光发射稳定且发射强度较强，整个微球呈现出核壳结构。通过与多层微球 SPSDVB-(PPV/PAA)n 的荧光性能比较，我们发现选用 PAA-b-PS 这一两亲性嵌段共聚物来自组装胶束粒子，不仅实现了间隔 PPV 层防止链穿插和自淬灭，还保留了 PPA 中羧基基团的生物耦和功能。此外，微球展示了较好的热稳定性和耐光漂白性。关键词：荧光微球，层层自组装，流式细胞技术，胶束，交联，生物耦合作者：邱钿指导教师：范丽娟教授IIPreparation of Fluorescent Microspheres with Functional Groupson the Surface for Bioconjugation via Layer-by-Layer TechniqueAbstractPreparation of Fluorescent Microspheres with Functional Groups on the Surface for Bioconjugation via Layer-by-Layer TechniqueAbstractFluorescent microspheres are widely used in the biomedical and clinical fields , while they are very expensive due to the liminted production. Developing simple and effective preparative methods for the fluorescent microspheres is of practical significance. Poly-(p-phenylenevinylene) (PPV) has many advantages such as facile preparation, good photostability and processability. Moreover, its precursor with positive charge can be easily coated onto the surface of negati