分娩发动前后孕妇蜕膜及外周血中nk nkt细胞生物学特性的研究-biological characteristics of nk nkt cells in decidua and peripheral blood of pregnant women before and after delivery.docxVIP

安徽医科大学硕士学位论文 安徽医科大学硕士学位论文 安徽医科大学硕士学位论文 安徽医科大学硕士学位论文 - - PAGE 4 - - - PAGE 5 - 情况的变化，并进一步检测外周血单个核细胞中Th1/Th2平衡的变化及NK细胞、 NKT细胞分泌Th1、Th2型细胞因子的情况，探讨其与分娩发动的关系，揭示NK细 胞及NKT细胞在分娩发动中的作用。并进一步研究母胎界面趋化因子CXCR4的表 达情况，试图探讨其与分娩发动前后NK细胞、NKT细胞重新分布之间的关系。研 究外周血及蜕膜组织中NK细胞、NKT细胞的功能状态与分娩发动的关系，无疑从 一个全新的角度诠释分娩这一生理现象，也为揭示妊娠时限异常疾病的发生机制 及最终有效防治提供新思路，并为生殖免疫的发展提供新的理论依据。 目的： 检测分娩发动前后蜕膜及外周血中NK细胞及NKT细胞的含量、表型、Th1/Th2 型细胞因子表达方面的变化，探讨NK细胞、NKT细胞独特的表型、功能与分娩发 动之间的重要联系。检测母胎界面趋化因子CXCR4表达的变化，以发现其与NK细 胞、NKT细胞在产程发动后在母胎界面重新分布及功能变化的联系。探讨母胎免 疫平衡在分娩发动中的作用。 方法： 1）收取正常晚孕分娩组(实验组，32例)和正常晚孕剖宫产组(对照组，34例)壁蜕膜 组织及同一人外周血，机械研磨法联合密度梯度离心法分离出蜕膜单个核细胞， 单纯密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞，流式细胞术检测蜕膜及外周血中 NK细胞、NKT细胞的含量及表型。 2）流式细胞术检测正常晚孕分娩组和剖宫产组外周血中Th细胞平衡的变化及NK 细胞、NKT细胞内Th1／Th2型细胞因子IFN-γ和IL-4的表达。 3）收取正常晚孕自然分娩及剖宫产孕妇壁蜕膜及胎盘组织(各6例),RT-PCR方法检 测胎盘及壁蜕膜中CXCR4的表达情况。 结果： 1）与剖宫产组相比，分娩组蜕膜中NK细胞及NKT细胞的构成低于剖宫产组,外周 血中NK细胞及NKT细胞构成高于剖宫产组(P＜0.01），两组蜕膜中NK细胞构 成均高于外周血(P＜0.01)。 2）蜕膜单个核细胞中，分娩组CD56+NKG2A+细胞、CD56+ NKG2D+细胞、NK细 胞表面NKG2A、NKG2D受体表达均低于剖宫产组(P＜0.05)。两组中NKT细胞 表面NKG2A、NKG2D受体表达无显著差异(P＞0.05)。 3）外周血单个核细胞中，分娩组CD56+NKG2A+细胞构成、NK细胞表面NKG2A 受体表达低于剖宫产组,(P＜0.05)。CD56+NKG2D+ 细胞构成、NK细胞表面 NKG2D的表达及NKT细胞表面NKG2A/NKG2D受体的表达高于剖宫产组,(P＜ 0.01)。 4）外周血单个核细胞中，分娩组外周血CD3+T细胞中Th1细胞含量高于剖宫产组(P ＜0.01），Th2细胞含量与剖宫产组无差异(P＞0.05）。分娩组NKT细胞、NK 细胞分泌IFN-γ的能力高于剖宫产组。分娩组NKT细胞分泌IL-4的能力高于剖宫 产组，NK细胞分泌IL-4的能力与剖宫产组无显著差异。 5）两组胎盘、胎膜均有CXCR4表达，剖宫产组胎盘、胎膜上CXCR4表达相对高 于分娩组。 结论： 分娩发动后外周血及蜕膜中NK细胞、NKT细胞的构成、表型及功能有变化。 分娩组蜕膜中NK细胞、NKT细胞含量降低，外周血中含量增加且倾向于Th1偏倚。 外周血中NK细胞、NKT细胞中NKG2D受体表达增高，提示其功能活化与分娩发动 有一定联系，并且这种变化与趋化因子存在一定关联。在分娩发动过程中免疫系 统存在变化，不仅表现在全身，在母胎界面也有明显变化，免疫平衡的改变可能 在分娩发动中起着重要作用。 关键词：自然杀伤T细胞；细胞因子；自然杀伤细胞，天然；分娩发动；自然杀伤 细胞表面活化性受体D The study of biological characteristic of NK cells and NK cells before and after the onset of normal labour Background： Abstract In normal pregnancy, there were immunotolerance between mothers immune system with paternal fetal , though many factors play a part in it. Recent years, many study display that NK cells and NKT cells play an impotant roles in fetal-maternal interface, they produce larg