仪器分析课件03紫外可见分光光度法宣讲培训.ppt

仪器测量条件（2） ?T确定后，可得Er-T的曲线 10 8 6 4 2 0 20 40 60 80 0.7 0.4 0.2 0.1 A T% 仪器测量条件（3） 当T＝36.8％，A＝0.434， Er最小。实际工作中，最好?控制A在0.15?1.0（T在10?70%）之间（?T=1%，Er5%） 可通过改变试样量、稀释试液或选用不同光程的吸收池来实现 采用高性能高仪器（?T小）或允许误差大时，A的取值范围可以变宽，但也不宜过浓。 测定波长的选择：?max（首选） 出射狭缝宽度的选择（低端仪器无此选项） 例：某钢样含镍约为0.12%，采用丁二酮肟光度法测定，过程如下：试样溶解后转入100 mL容量瓶中，显色后定容；然后取部分试液在波长470 nm处用1 cm吸收池进行测量。如果希望此时的测量误差最小，应称取试样多少克？（已知有色配合物的?=1.3?104镍的原子量= 58.69） 称样的最适质量范围？ 显色反应条件（1） 显色剂用量、溶液pH、反应温度及时间等显色反应条件均会影响到测定结果的重现性和准确度，因此在进行定量分析前需对其进行优化。 通常采取单因素实验法，即在其他影响因素固定的前提下（通过文献调研或预作来确定相应数值），只改变待考察因素，测定仪器响应（吸光度）并绘制相应曲线，根据曲线形状来确定该因素的最佳取值。 显色反应条件（2） 显色剂R用量 选择曲线平台处对应的显色剂用量作为最佳显色剂用量 常见形式 显色反应条件（3） 显色反应pH 显色反应的完成度、配位数和待测离子是否发生水解等与 pH 有关，需通过实验确定最佳pH值 ，缓冲溶液控制。 pH1pHpH2 显色反应条件（4） 确定显色温度及显色时间 T1(?C) T2(?C) t1(min) t2(min) T(?C) t(min) 如果存在其它影响因素，也应采用相同的实验方法确定最适条件。 参比溶液的选择（1） 试样：待测组分+基体（与试样来源有关） 待测液：待测组分+基体+相关试剂+溶剂 理想空白：基体（ ）+相关试剂+溶剂 若测定条件下基体及所用试剂均无吸收，则可用溶剂参比 若测定条件下基体无吸收，则可用试剂参比，即相关试剂+溶剂（最常用的参比形式） 若存在基体吸收，可尽量通过显色剂选择、测定条件优化或掩蔽、分离等方式消除基体的影响，这样还可以用试剂参比） 参比溶液的选择（2） 若上述手段无效，则需更换其他参比，譬如： 试样参比：若仅存在基体干扰且干扰成分与显色剂不反应（显色剂和其他试剂无干扰），可采用试样参比（除不加显色剂，其他步骤与试样处理相同）。 平行操作溶液参比：用不含被测组分的试样（基体一致），在相同条件下与被测组分进行同样的处理，然后做为参比。 系列标准溶液 待测液 试剂参比 本实验所用显色剂和其他试剂在测定波长处无吸收，因此也可用水做参比（溶剂参比），但实际测定中通常是采用试剂参比。若水样中存在干扰物质，待测液需选用合适的参比溶液或采取适当的手段。 例：邻二氮菲显色法测定水样中微量铁 水样处理：用适量HCl酸化采集试样（浑浊液则需过滤或进行其他处理；粗测后决定试样是否需稀释或浓缩） 标准系列及试样溶液的配制 容量瓶（50 mL）编号 0 1 2 3 4 5 6 100 mg?L-1 Fe2+溶液/mL 0 0.3 0.6 0.9 1.2 1.5 5.0 10％盐酸羟胺水溶液 /mL 1 1 1 1 1 1 1 混匀后放置3-5 min 0.2％邻菲啰啉溶液/mL 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 pH4.6的HAc-NaCl缓冲液 5 5 5 5 5 5 5 定容至50mL，放置10 min后于510 nm处测定A 干扰及消除方法（1） 干扰的产生原因 干扰物质本身或与显色剂作用后在测定波长下也有吸收； 干扰物质与显色剂或被测物质形成稳定的配合物，使显色反应完成度降低或不能进行； 显色条件下，干扰物质水解形成沉淀，造成溶液浑浊而干扰吸光度的测定。 pH的影响（1） 苯胺 pKb= 9.3 介质 K B 水 230 280 酸 203 254 苯酚 pKa= 9.95 介质 K B 水 210.5 270 碱 235 287 A 200 250 300 230 280 中性 酸性 苯胺UV吸收光谱图 pH的影响（2） 酸碱条件改变导致物质结构发生变化 溶剂的影响（1） 1. 蒸气状态 2. 环己烷中 3. 水中 溶剂极性增大，溶质分子吸收峰的振动精细结构逐渐消失 吸光度 溶剂的影响（2） 溶剂极性对n??*和???*跃迁能量的影响 能 量 溶剂极性对异丙叉丙酮跃迁谱带的影响 跃迁类型 正己烷 氯仿 甲醇 水 n??* 329 nm 315 nm 309 nm 305 nm 蓝移 ???*