三酶赵玉娥.pptxVIP

酶的应用和研究史; 酶是一类由活细胞所产生的，具有催化活性和高度专一性的特殊蛋白质。它们是生物体系的催化剂。; 3.1.2.1 酶的命名 1.习惯命名法（1961之前） （1）根据作用底物命名； （2）根据酶促反应性质命名； （3）将底物和反应性质结合命名； （4）有的为区别同一类酶还标明酶的来源和性质。 ;2.系统命名法 按国际系统命名法原则，每个酶都有一个习惯名和一个系统名。系统名应标明酶的所有作用底物和反应性质（底物之一是水时可以略去），不同的底物之间用“:”隔开。若底物有构型要求，也需标出。 草酸氧化酶---草酸：氧氧化酶 乙酰辅酶A水解酶---乙酰辅酶A：水水解酶 ;3.1.2.2 酶的系统分类法及编号;酶的国际系统分类法编号示例;1. 氧化还原酶类;黄嘌呤氧化为尿酸;2. 转移酶类;3. 水解酶类;4. 裂合（裂解）酶类;5. 异构酶类;6. 合成酶类;3.12.3 根据酶蛋白分子特点 和分子大小分类;3.2 酶的化学本质;3.2.2 酶的组成;主要可溶性维生素和相应辅酶;3.3 酶的特性;活化能与酶催化的中间产物理论;3.3.2 酶的作用有高度专一性;2. 相对专一性 有的酶对底物的化学结构要求比绝对专一性略低，它们能作用于一类化合物或一种化学键。 1） 键专一性 有的酶只作用于一定的键，而对键两端的基团并无严格要求。 如：脂肪酶 2）基团专一性 一些酶，除要求作用于一定的键以外，对键两端的一个基团要求严格，对另一个基团则要求不严格。 如：胰蛋白酶;3、立体异构专一性;消化道内几种蛋白酶的专一性;3.3.3 酶活性在体内的可调控性 酶量的调控：改变酶的合成和降解速度； 酶活性的调控：酶原激活、反馈调节、抑制剂调节、共价修饰调节、反馈调节、激素调节等。;3.4 酶的结构和功能;1. 酶作用的专一性主要取决于酶活性中心的结构特异性（即酶蛋白部分） 2. 保持活性中心的空间结构是维持酶活性所必需的;3.4.2 酶的别构（变位）部位;;反应过程中间代谢物易作为别构剂作用; 3.4.3 酶原的激活;例：胰蛋白酶酶原的激活;;3.4.4 同工酶;乳酸脱氢酶同工酶形成示意图;不同组织中LDH同???酶的电泳图谱;3.4.5共价调节酶;例：糖原磷酸化酶的共价调节;磷酸化酶激酶的共价磷酸化调节;酶含量的调节;3.4.6 诱导酶;3.4.7 核糖酶;3.4.8 抗体酶;抗原.抗体结合与酶.底物结合;酶的催化遵从一般催化剂的催化规律： （1）加速反应速率，反应前后质和量无变化； （2）加速热力学化学反应，不触发热力学上不可能进行的化学反应； （3）缩短反应达到平衡的时间，不改变平衡点； （4）对正负反应都有催化作用。;;3.5.2 中间产物学说;诱导契合学说;底物构象改变学说;3.5.4 使酶具有高催化效率的因素;3.5.4.2 共价催化：亲核催化与亲电催化;3.5.4.3 底物构象改变学说;3.5.4.4 酸碱催化;3.6 酶促反应动力学;酶促反应速度的测定;3.6.1 酶浓度的影响;3.6.2 底物浓度的影响;3.6.2.1 矩形双曲线;3.6.2.2 单分子酶促反应的米氏方程及Km;米氏常数的意义（1）;（4） Vmax和米氏常数的测定;双倒数作图法;练习：已知某酶的Km值为0.05mol.L-1，要使此酶所催化的反应速度达到最大反应速度的80％时底物的浓度应为多少？ ;3.6.3pH对酶反应速度的影响;3.6.4温度与酶反应速度的关系;3.6.5激活剂对酶作用的影响; 3.6.6抑制剂对酶作用的影响;抑制剂类型和特点 ;1.非专一性不可逆抑制剂;2.专一性不可逆抑制剂 ;抑制剂与酶以非共价键???合，两者结合疏松，用透析等物理方法除去抑制剂后，酶的活性恢复。;+;+;特点： Km增大，Vm不变；抑制作用的强弱取决于底物与抑制剂浓度的相对比例；底物浓度增加到足够大，抑制作用可解除。;实例1：丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用;非竞争性抑制作用 I与酶活性部位以外的部位可逆结合，不影响S与E的结合，也不影响ES与I的结合，但结合了I的酶无活性，等于减少活性酶分子。;;反竞争性抑制作用;3.7 酶的分离提纯及活力测定 3.7.1 分离提纯;物理破碎法 (1)研磨 手磨法是实验室内常用的方法。用石英砂或氧化铝作助磨剂来制备无细胞抽提液。此法简单但效率低，制备量少。球磨法，将干菌体放人球磨机，经数小时研磨，用水或缓冲液抽提。石磨法是选择坚硬的石磨，