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IMP型金属β-内酰胺酶研究进展 　　文章编号：1009-5519（2008）13-1981-02 中图分类号：R9 文献标识码：A 　　 　　金属β-内酰胺酶又称金属酶，属Bush功能分类中的第三组，Ambler分子结构分类中的B类。这类酶能够水解几乎所有的β-内酰胺类抗生素，但对单环类抗生素敏感，其活性不被β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸、舒巴坦和三唑巴坦抑制，但可被金属螯合物如乙二胺四乙酸（EDTA）及巯基化合物等所抑制。现对IMP型MBLs的研究情况做一综述。 　　 　　1 IMP型MBLs的特点、功能及传播机制 　　 　　IMP家族多数由IMP-1突变产生，与其同源性较高，但各亚型对底物的水解活性不尽相同，这主要与各自的结构特点有关。IMP-1是第一个被发现的获得性MBL，水解底物谱较广，包括广谱头孢菌素类及碳青霉烯类抗生素；blaIMP-1基因位于质粒介导的I类整合子上，并已在肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌及其他非发酵革兰阴性杆菌中广泛传播[1]。1995年，Arakawa等[2]发现blaIMP-1基因盒位于一个新的大质粒介导的整合子样元件上，后来将这种新的元件命名为Ⅲ类整合子。IMP-3与IMP-1相比，仅有2个氨基酸替代，而其中196位丝氨酸（Ser）残基被甘氨酸(Gly)残基取代，导致其不能水解青霉素、氨苄西林、亚胺培南和头孢他定，与之对应的，存在blaIMP-3基因核苷酸序列640位鸟嘌呤代替腺嘌呤，这表明由于点突变使IMP-1的作用底物谱增宽，由此认为IMP-3可能是IMP-1的祖先。blaIMP-6基因的核苷酸序列也存在着相同的碱基转换，导致196位Gly替代Ser，这种点突变使IMP-6对帕尼培南，尤其是美罗培南的水解活性明显强于亚胺培南，这与IMP－1相反，表明IMP-6具有更广的底物谱。但其抗青霉素G、哌拉西林的活性显著降低[3]。进一步研究显示，blaIMP-4位于I类整合子上，其下游还存在其余3个耐药基因盒qacG2、aacA4及catB3，分别编码对季胺化合物、氨基糖甙类及氯霉素耐药性[4]。IMP-5与IMP-1、IMP-3及IMP-4的同源性大于IMP-2，分别为93%、92%、91%和87%，其PI为9.3，表现为对青霉素类、广谱头孢菌素类及氨曲南高度耐药，但对氨苄西林/舒巴坦、氨基糖甙类和喹诺酮类抗生素敏感；blaIMP-5基因单独位于I类整合子上[5]。产IMP-7的铜绿假单胞菌曾在加拿大的两个医院引起爆发流行，该??株对碳青霉烯类、氨基糖甙类、环丙沙星及头孢他定耐药，但对哌拉西林敏感；核苷酸序列分析表明，IMP-7与IMP-1的同源性为91%；blaIMP-7基因位于I类整合子的第三个基因盒位置，与其相邻的两个基因盒分别为aacC4和aacC1，均编码对氨基糖甙类耐药性[6]。IMP-10与IMP-1相比，由于一个碱基的改变，导致49位缬氨酸代替苯丙氨酸，这一改变使得IMP-10对青霉素类水解活性明显下降，而对头孢菌素及碳青霉烯类水解能力影响不大；包含blaIMP-10的基因盒被插入于整合子上的一个特定位点GTTRR RY之中，基因盒的核苷酸序列与blaIMP-1基因盒相同，表明blaIMP-10基因和blaIMP-1一样能在不同菌株之间转移，从而导致产IMP型MBLs菌株的播散。 　　IMP-2与IMP-1同源性为85%，动力学参数显示，两者对头孢西丁、头孢他定、头孢吡肟及亚胺培南的水解活性相似，但对氨苄西林、羧苄西林、美罗培南及头孢噻啶明显不同；blaIMP-2基因盒位于I类整合子上，但其59be与blaIMP-1不同，表明编码这两种IMP变异体的基因盒起源不同[7]。2001年，我国台湾省一株多重耐药的肺炎克雷伯杆菌中发现的质粒介导的IMP-8，与IMP-2相比仅有2个氨基酸差异，其同源性大于IMP-1，产IMP-8的转化株大肠杆菌，表现为对青霉素类、头孢菌素类及碳青霉烯类的敏感性降低，而对氨曲南依然敏感；blaIMP-8基因盒与编码对氨基糖甙类耐药的基因aacA4共同位于质粒来源的I类整合子上[8]。IMP-12与其他IMP酶差别较大，同IMP-8和IMP-2关系最近，一致性分别为88.6%和88.2%，与IMP-1的一致性为85%，其基因位于50kb大小的非自传递型质粒pVA758上；动力学分析显示，IMP-12对青霉素类水解活性较弱，不能水解甲氧青霉素和氨曲南，与IMP-1相比一个显著的特点是，其对亚胺培南具有相当高的Km值，为920 μM。IMP-13与IMP-8和IMP-2的一致性分别为93%、92.3%，blaIMP-13位于I类整合子第一个基因盒位置，表明该基因盒于近期才获得，与其紧邻的是一个编码氨基糖苷修饰酶基因aac(6)-Ib。IMP-14与I