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递增负荷运动大鼠组织自由基代谢变化及营养干预影响研究 　　摘要：大负荷递增负荷运动导致自由基的生产增加是影响运动能力的重要因素。对长期递增负荷运动大鼠组织自由基代谢状况及营养干预后自由基代谢变化进行研究。研究结果：长期递增负荷运动导致骨骼肌、肝脏SOD、GSH-PX酶活性显著降低，组织自由基代谢紊乱；营养干预显著提高运动大鼠组织SOD、GSH-PX酶活性，营养补剂对改善运动训练造成的自由基紊乱具有积极意义。 　　关键词：递增负荷；自由基；营养 　　中图分类号：G804.7文献标识码：A文章编号：1007-3612(2008)03-0343-03 　　 　　肌肉组织是运动系统的重要组成部分，肌细胞功能的是否正常与机体的运动能力密切相关。肝脏是人体的最大腺体，在物质代谢中起重要作用，脂肪的吸收、分解和保存；糖的分解和糖异生；蛋白质的分解与合成都与肝脏密切相关，肝脏功能的降低也是影响身体机能??重要因素。运动时这些重要组织会产生大量自由基，自由基对这些组织细胞膜的攻击是引起组织损伤的原因之一，从而导致这些组织功能的降低，进而造成运动能力的降低。本研究通过对长期递增负荷运动训练大鼠骨骼肌、肝脏组织内自由基代谢情况的研究，了解大负荷运动组织内自由基代谢变化的规律，探询自由基变化对运动能力的不利影响；并且应用营养补剂对长期递增负荷运动大鼠进行干预，研究营养补剂对自由基代谢的影响，为今后在运动实践中提供良好的抗氧化剂提供理论依据。 　　 　　1实验材料与方法 　　 　　1.1实验动物与分组雄性Wistar大鼠30只，体重(200±15)g，由中国医学科学院实验动物研究所提供。动物许可证编号：SCXK11－00－0006，动物级别：二级。将大鼠随机分为3组，C组（对照组，n=10）；E组（递增负荷跑台运动组，n=10）；EN组（递增负荷跑台运动+营养补充组，其在第五周跑台训练结束后进行营养补充，共补充6周，n=10）。动物饲料为全价营养颗粒饲料，由北京科澳协力饲料有限公司提供。京动许字（2000）第15号，含铁量32.1 mg/100 g。动物饲养环境温度(23±2)℃，湿度40%～60%。大鼠分笼饲养，每个鼠笼5只。自由饮食，自然昼夜节律变化光照。实验动物分组情况见表1。 　　 　　1.2运动方式E组和EN组大鼠在杭州段氏BCPT－96型跑台上进行11周递增负荷跑台训练。训练时采用跑台坡度为0°，跑台速度为30 m/min，每周训练6 d，周日休息。如果训练过程中大鼠出现严重力竭症状：后肢蹬地无力，腹部与跑道面接触，连续施加机械刺激大鼠不能继续跑动，则允许其休息2～5 min。整个运动过程中，未使用电刺激(表2)。 　　 　　1．3营养补剂成分及补充方法补充营养主要含中药和维生素C、维生素E等组成。从第6周训练开始，EN组的每只大鼠于每日两次训练结束后30 min后以灌胃方式补充复合制剂，每次1 mL。 C组和E组大鼠以灌胃方式补充等量蒸馏水。 　　1．4取样方法及样品保存根据分组要求，在最后一次运动后24 h对各组进行取样。以2％戊巴比妥实行腹腔注射麻醉，迅速取出大鼠腓肠肌、肝脏。取组织块（0．8 g左右）在4℃的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，放入10 mL的小烧杯内。取预冷的生理盐水，用玻璃匀浆器进行组织匀浆，制备10%匀浆液，用普通离心机3 000 r/min左右离心15 min，离心好的匀浆留上清弃下面沉淀。上清液用于各种指标的测定。 　　1．5测试方法 　　1．5．1丙二醛（MDA）的测试方法试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。严格按照试剂盒说明书操作。 　　1．5．2超氧化物歧化酶（SOD）的测试方法试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。严格按照试剂盒说明书操作。 　　1．5．3谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的测试方法试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。严格按照试剂盒说明书操作。 　　1．5．4组织蛋白含量的测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。严格按照试剂盒说明书操作。 　　1．6数据处理方法实验数据采用SPSS统计学软件包进行one-way ANOVA检验，显著性水平为P＜0．05，非常显著性水平为P＜0．01。实验数据由平均数±标准差表示。 　　 　　2结果 　　 　　2．1营养干预对递增负荷运动大鼠骨骼肌MDA、SOD、GSH-PX值递增负荷跑台运动后，E组与C组大鼠比较，骨骼肌中MDA无显著性差异。E组大鼠骨骼肌中SOD活力、GSH-PX活力与C组大鼠比较明显降低，有非常显著性差异（P2．?-岐化为过氧化氢和氧气，它可特异性的清除超氧阴离子自由基［3］。GSH-PX是机体内广泛存在的一种重要的还原过氧化氢（H2O2），谷胱甘肽过氧化物酶含有硒，存在于细胞