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荧光色素：不同于一般染料，它可以吸收激发光的光能和发射荧光。 应用：自发荧光：VA-----绿；VB----黄色；血卟啉—红 单胺类甲醛诱发荧光，肾上腺素-----黄绿；5-羟色胺—黄色 荧光染色：吖啶橙----DNA\RNA……. 免疫荧光：荧光素标记一抗或二抗，直接法；间接法---定位抗原。 荧光染料： 1。吖啶橙（Acridine orange);碱性，最大吸收波长495，最大荧光波长530—630，能染细胞核，粘液及细菌 ，呈黄绿色荧光。 2。吖啶黄（Acriflavine):碱性，最大吸收波长455，最大荧光波长450—700，染细胞和细菌。呈黄绿----桔黄色荧光。 3。异硫氰酸荧光素（FITC):酸性，最大吸收波长495，最大荧光波长490—610，染细胞，蛋白质标记（免疫荧光抗体）。呈黄绿色荧光。 4。樱草素（Primulin):酸性，最大吸收波长360，最大荧光波长400—500，染细胞和细菌。呈蓝色荧光。 5。罗达明B(Rhodamine B): 碱性，最大吸收波长560，最大荧光波长540—660，染细胞，蛋白质标记，细菌。呈橙红色荧光。 6。金胺 O(Auramineo): 碱性，碱性，最大吸收波长435，最大荧光波长490—590，染细胞，细菌。呈绿色---金黄色荧光。 7。曲利本兰（ Trypanblue):酸性，最大吸收波长405，最大荧光波长530—630，染弹性纤维。呈亮红色荧光。 8。荧光素(Fluorescein):酸性，最大吸收波长405，最大荧光波长480，染细胞和细菌。呈蓝绿色荧光。 荧光显微镜原理 一、荧光显微镜 　　荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤片系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像（图3-15）。 （一）光源 　　超高压汞灯的发光是电极间放电使水银分子不断解离和还原过程中发射光量子的结果。它发射很强的紫外和蓝紫光，足以激发各类荧光物质，因此，为荧光显微镜普遍采用。 超高压汞灯也散发大量热能。因此，灯室必须有良好的散热条件，工作环境温度不宜太高。 　　200W超高压汞灯的平均寿命，在每次使用2h的情况下约为200h，开动一次工作时间愈短，则寿命愈短，如开一次只工作20min，则寿命降低50%。因此，使用时尽量减少启动次数。灯泡在使用过程中，其光效是逐渐降低的。灯熄灭后要等待冷却才能重新启动。点燃灯泡后不可立即关闭，以免水银蒸发不完全而损坏电极，一般需要等15min。由于超高压汞灯压力很高，紫外线强烈，因此灯泡必须置灯室中方可点燃，以免伤害眼睛和发生爆炸时造成操作。 （二）滤色系统 　　滤色系统是荧光显微镜的重要部位，由激发滤片和阻断滤片组成。滤片型号，各厂家名称常不统一。滤片一般都以基本色调命名，前面字母代表色调，后面字母代表玻璃，数字代表型号特点。如德国产品（Schott）BG12，就是种蓝色玻璃，B是蓝色的第一个字母，G是玻璃的第一个字母；我国产品的名称已统一用拼音字母表示，如相当于BG12的蓝色滤片名为QB24，Q是青色（蓝色）拼音的第一个字母，B是玻璃拼音的第一个字母。不过有的滤片也可以透光分界波长命名，如K530，就是表示阻断波长530nm以下的光，而透过530nm以上的光。还有的厂家的滤片完全以数字命名，如美国Corning厂的NO：5-58，即相当于BG12。 　　用于荧光显微镜的主要滤片如表3-1。 基本色调 相应名称 2mm厚透光范围（峰值）nm 上海电器元件厂 德国（Schott） 苏联 日本 黑紫 ZWB-1 UG-1 yΦC-2 DV-1 300～400（365） 黑紫 ZWB-2 UG-5 yΦC-1 　 280～240（360） 靛蓝 ZB-2 BG-1 ΦC-1 BG-1 300～500（380） 靛蓝 ZB-3 BG-3 CC-4 BG-3 260～520（400） 靛蓝 QB-24 BG-12 CC-8 BG-12 310～570（420） 淡蓝 QB-10 BG-38 C3C-5 　 310～720（460） 　 QB-12 　 -8 　 　 　 　 　 -11 　 　 橙黄 CB-3 OG-1（K530） OC-11 OG-1 530以上 橙黄 JB-8 OG-4（K510） ЖC-18 FY-5 510以上 绿橙 JB-7 GG-11（K490） ЖC-17 FY-3 480以上 　 　 　 　 FY-4 　 淡绿 JB-4 GG-3（K430） жC-11