第八章 酶的人工模拟(04 幻灯片)PPT.pptVIP

第七章 酶的人工模拟 第一节 模拟酶 什 么 是 模 拟 酶 ？ 为什么要模拟酶 模 拟 酶 学 科 的 诞 生 和 发 展 模拟酶分类（按属性分） 模 拟 酶 属 仿 生 学 范 畴 神秘的生物体系是众多领域发明创造的源泉。 酶在生命体系中扮演了最重要的角色！ 固氮酶固定空气中的氮所需条件比化学合成氨系统缓和得多，充分证明生物酶的优越性。 许多科学家曾进行过化学模拟固氮酶的研究，并取得一定效果。 什 么 是 模 拟 酶 ？ 别称：人工酶、酶模型。 顾名思义：模拟酶不是天然酶，是人工合成的具有催化性质的大分子。 和天然酶不同处：分子结构较天然酶简单。 和天然酶相同处：在分子水平上模拟天然酶活性部位的形状、大小及微环境等结构特征，模拟天然酶的作用机理和立体化学等特性。 为什么要模拟酶 我们说，酶是自然界长期进化产生的生物催化剂，它能在条件温和下高效的专一性的催化某些化学反应。但是它有着对热敏感、稳定性差、来源有限等缺点。限制了它的开发和利用。 因此，就出现了酶分子的修饰、固定化酶等技术提高了酶的稳定性，弥补了酶对热敏感的缺点，同时，模拟酶—新的催化剂的研制和开发则弥补了酶来源有限这一缺点。 如 何 设 计 模 拟 酶 ？ 设计前的工作： 1、应了解所要模拟的酶的活性中心－底物复合物的结构； 2、酶的专一性及其同底物结合的方式与能力； 3、反应动力学及各中间物的性质。 模拟酶分类（按属性分） 主－客体酶模型：环糊精、冠醚、穴醚、杂环大环化合物、卟啉等。 胶束酶模型。 肽酶。 抗体酶。 分子印迹酶。 半合成酶。 环糊精（CD）酶模型 由6－8个D－葡萄糖以1，4糖苷键连接的环状锥形圆筒。CD可以合成，也可以由微生物生产。 羟基伸出筒口，故外侧亲水，可与多种客体形成氢键；内腔疏水，能包结多种客体分子（类似酶识别底物）。 环糊精和底物结合常数小于酶，修饰后可达到酶和抗体的结合水平。 合成的主－客体酶模型p200 环糊精是天然的主客体酶模型。 冠醚、穴醚、环番、环芳烃等是合成的主客体酶模型。 右图的主体部分是“ 冠醚 ”，并带有巯基（和半胱氨酸类似），是个仿酶模型。在此模型内可合成二肽。 胶 束 模 拟 酶 胶束模拟酶： 表面活性剂形成的胶束，在水溶液中提供疏水微环境，类似于酶的结合部位，利于束缚底物，胶束上还可以结合咪唑、巯基、羟基、辅酶等催化基团（电荷中继系统），等于提供了“ 活性中心”。则胶束本身就成为具有酶活力或部分酶活力的模拟酶。 模拟水解酶的胶束模拟酶 结构：许多表面活性剂偶联到一起，成了很大的“ 单分子”。疏水空腔中结合了“催化基团”。 特点：既适合底物结合，又接近催化基团，因此，催化效率高（高几千成万倍）p203例子。 肽酶（pepzyme） 本质：人工合成的多肽。 特点：具有所模拟的天然酶的活性部位。 合成： 先通过各种方法搞清天然酶的结构，特别是活性部位的组成。 合成时不必完全仿造天然酶，除活性部位不能替换外，其它部分可以适当简化（前提是维持活性部位构象，得到理想酶活）。 半合成酶－－天然酶的化学修饰 含义：一半天然，一半合成 合成方式： 1、天然酶侧链修饰； 2、天然酶上接上相应辅酶； 3、半合成抗体酶：在抗体（底物作为抗原）结合部位附近引入催化活性基团。有利于结合底物和提高反应效率。 第二节 抗体酶（Abzyme) 一、抗体酶的定义 二、抗体与酶的异同 三、抗体酶的制备 四、抗体酶的应用 IgG的三级结构 一、抗体酶的定义 抗体酶又称催化抗体（catalytic antibody），是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物，本质上是一类具有催化活力的免疫球蛋白，在其可变区赋予了酶的属性。 二、抗体与酶的异同： 相同点：都是蛋白质，都有特异性。 不同点： 1）抗体无催化活力，酶有催化活力。 2）本质差别：酶是能与反应过渡态选择结合的催化物质，抗体是和基态紧密结合的物质。 3）酶的活性和合成受到代谢调节，种类有限。 抗体只有在抗原存在时才产生，种类无限。 三、抗体酶的制备 1. 细胞融合法（诱导法） 用设计好的半抗原，通过与载体蛋白（如牛血清白蛋白）偶联制成抗原。然后对动物进行免疫，取免疫动物的脾细胞与骨髓瘤细胞杂交，杂交细胞则分泌单克隆抗体，经筛选和纯化，得抗体酶。 2. 拷贝法 用酶作为抗原免疫动物得到抗酶的抗体，再将此抗体免疫动物并进行单克隆化，获得单克隆的抗抗体。对抗抗体进行筛选，获得具有原来酶活性的抗体酶。 四、抗体酶的应用 1、用于有机合成 2、在医疗上的应用 * * 环糊精目前可以通过微生物发酵由淀粉转化而来。环糊精也是一种功能寡糖。