骨移植材料成骨效能检测指标及方法选择与应用.docVIP

骨移植材料成骨效能检测指标及方法选择与应用 　　目前，临床上对于骨移植材料的需求量日益增加，各种类型的骨移植材料已经在实验研究中取得了一定的成效并逐渐进入临床应用研究阶段，评价骨移植材料成骨效能的指标也愈来愈多样化，各项指标之间各有侧重，从不同的角度反映材料的骨修复能力。本文通过检索近几年的相关研究文章，对各项评价骨材料成骨效能的检测指标及其对应的检测方法做了如下总结。本文将成骨效能的检测指标归纳为新骨形成，微血管形成，成骨活性标志物的表达，骨组织形态及生物强度检测等几个方面，根据检测指标的需要，对各种特异性检测方法也作了总结，现综述如下。 　　1 新骨形成与骨组织形态的检测 　　1.1 影像学检测：X-ray是最常见，也是最原始的检测方法，早在1896年便开始应用于医学影像，是目前医学诊断的重要手段之一。目前，研究者在使用X-ray的同时，多采用一些定量或半定量的评分标准，对X-ray显像结果进行定量分析、比较。窦洪磊等[1]应用X-ray结合Lane-Sandhu评分系统对同种异体骨移植修复大段骨缺损疗效进行检测，将X-ray显像结果通过计分转变为数值进行统计分析与比较。Mahesh等[2]采用X-ray结合Kuznetsov半定量评分标准检测人类骨髓间充质干细胞的体内成骨情况，同样将X-ray检测结果转化为计分，利用统计学方法进行分析比较。 　　螺旋CT三维重建在骨缺损修复疗效的检测方面目前应用较多，利用多层螺旋CT进行图像分析和骨密度测定可以更直观地了解骨组织缺损重建后局部组织再矿化的程度。国内外学者已应用定量CT进行三位的骨密度测量，并取得了一定成果[3-4]。多层螺旋CT 技术能将骨皮质和骨松质的图像显示得更加清晰，通过调整图像能使人眼更易观察到细微的灰度变化，以便更加精确和全面地对冠状位、矢状位和横断面的三维CT图像进行测量，准确反映局部骨密度变化；螺旋CT图像不仅可以通过不同灰阶度显示其密度的高低，还可用组织对X射线的吸收系数反映其密度高低的程度，即CT 值。Maki等[5]通过体外试验显示，CT值与羟基磷灰石浓度有较高的相关性。Norton等[6]及Shahlaie等[7]亦认为CT值用于对缺损区修复再造后骨密度的评价具有一定??价值，可以用CT测量值来预测骨密度。 　　CBCT是近几年新发展的检测技术，它具有一次扫描、三维成像，三维影像更加清晰，最小分辨率可达到0.125mm，并可以实时显示横纵断面的三维影像，使得成骨效能的检测更加全面、直观、可靠。随着CBCT在口腔医学影像诊断学的发展应用，已有不少研究者将CBCT应用于颌面骨缺损修复效果的检测。刘苗等[8]应用CBCT观察人工骨对兔下颌骨缺损的修复效果，得到清晰的三维图像，能够多角度多层面地观察下颌骨缺损修复后的成骨情况，提示CBCT作为骨效能检测手段的可行性。Roe等[9]及Kim等[10]也应用CBCT评价骨缺损修复的效果，认为CBCT在骨检测方面具有广阔的应用前景。 　　1.2 组织形态学检测：伊红-苏木素染色法 （hematoxylin-eosin staining），简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一，科研中最基本、使用最广泛的技术方法。其原理是去氧核糖核酸（DNA）带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明对比。目前，HE染色不仅应用于骨组织标本的定性分析，也结合一些评分标准进行定量分析，如有学者采用HE染色结合Nibson骨缺损组织形态学评分标准对骨组织形态进行定量分析取得了不错的效果[11-12]。 　　茜素红染色（alizarin red S staining）同样也是一种钙结节的特异性染色方法，其原理是茜素红能够与钙离子发生显色反应，产生一种深红色的鳌和物，用以识别组织细胞的钙盐成分，将沉积的钙盐结节染成深红色，主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。但它的缺点是容易受到其它金属元素的干扰。目前，大量的国内外学者对于培养细胞表明钙盐的沉积及新骨组织中钙结节的检测均倾向于采用茜素红染色，充分体现其检测的特异性及可靠性[13-16]。 　　1.3骨密度及骨矿化检测：骨密度（bone mineral density， BMD），全称“骨骼矿物质密度”。影像学领域的骨密度是指单位骨体积或面积的平均骨矿物质含量， 是反映骨质量的重要指标。早期、精确地BMD检测可以及时了解骨