第四章 微生物的代谢调控与代谢PPT课件.ppt

第四章 微生物的代谢调控与代谢工程;第一节微生物代谢的自我调节;一、酶活性调节;1、共价修饰 酶活性调节（continued ）;1）可逆共价修饰;;;3、缔合与解离 酶活性调节（continued）;4、竞争性抑制酶活性调节（continued）;二、酶合成的调节;一）酶合成调节的类型;1、酶合成的诱导（induction）; 诱导剂可以是诱导酶的底物，也可是底物的结构类似物 如：乳糖是大肠杆菌β-半乳糖苷酶合成的诱导剂，也是此酶的底物 [实际上乳糖不是真正的诱导物，它必须先转化为别构乳糖才能起诱导剂的作用] ?? 诱导剂也可以不是该酶的作用底物 如异丙基- β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）是β-半乳糖苷酶合成的极佳诱导剂，但不是作用底物； ?? 酶的作用底物不一定有诱导作用 如对硝基苯-α-L-阿拉伯糖苷是β-半乳糖苷酶的底物，但不能诱导该酶的合成。 ;;2、酶合成的阻遏(repression);;;?? 最典型的例子是细胞通过最易利用的碳源（如葡萄糖）的分解产物来抑制一些酶的合成。 ?? 这个现象最早在青霉素的生产中发现，可快速利用的葡萄糖致使青霉素产量特别低，而缓慢利用的乳糖却能较好地生产青霉素。 进一步的研究表明，乳糖并不是青霉素合成的特殊前体，它的价值仅在于缓慢利用。被快速利用的葡萄糖的分解产物阻遏了青霉素合成酶的合成。 这种抑制青霉素合成及乳糖利用的现象，起初认为只有葡萄糖才会产生，故称为葡萄糖效应。 ;把大肠杆菌培养在含有葡萄糖和乳糖的培养基中，可明显看到大肠杆菌经历了两个对数期。 葡萄糖在第一个周期中被利用。在葡萄糖代谢初期，β-半乳糖苷酶和半乳糖苷透性酶的合成受阻遏，使乳糖不被利用。 葡萄糖被消耗完后，乳糖代谢所需的酶开始合成，于是出现了利用乳糖的第二个生长周期。 ;二）酶合成调节的分子机制;;三、分支生物合成途径的调节;2、协同反馈调节(concerted feedback regulation);3、累加反馈调节 (cumulative feedback regulation);4、增效反馈调节 (cooperative feedback regulation);5、顺序反馈调节 (sequential feedback regulation);6、联合激活或抑制调节;;四、能荷调节;第二节微生物的代谢调控;一、克服反馈抑制和反馈阻遏的调控;1、降低末端产物浓度;;但是，完全不能合成产物E的突变体，因为不能利用E去进一步合成必须的细胞物质，所以无法正常生长。为了保证突变体的正常生长，培养时须提供低浓度的、不足以引起反馈调节的物质E。这样高浓度的中间产物C就能积累起来了。 例如： 利用枯草杆菌的精氨酸缺陷型生产瓜氨酸，利用大肠杆菌的赖氨酸缺陷型生产苏氨酸，都是这个道理。 ;2）提高细胞渗透性;2、抗反馈调节突变株 的利用;二、克服分解代谢阻遏的调控;克服分解代谢阻遏的调控(continued;第 四 节代 谢 工程;一、代谢工程概述;2、代谢工程的基本过程;;3、代谢工程的基本原理; ;1、代谢网络结构组成;;2、代谢网络结构的基本类型;;;对于独立型网络而言，只要改变在某一节点上的代谢物流量分配，就有可能提高终端产物的产率。 如图中节点1或2处的流量分配朝有利于产物P形成的方向改变，能在某种程度上提高其产 但在相依型网络中，若要提高目标产物的转化率，这两个节点的流量分配则必须同时改变。 ;3、节点类型;;2) 刚性节点;3) 半柔性节点;三、代谢工程的应用;1、改变代谢途径;1）加速限速反应;;;3、转移或构建新的代谢途径;1）转移代谢途径 如 将真养产碱菌的PHB 操纵子 （PHB 多聚酶、硫解酶、还原酶）克隆到大肠杆菌, 重组大肠杆菌就可积累PHB. 2）构建新的代谢途径 如 将碳霉素生物合成基因克隆到螺旋霉素产生菌二素链霉菌中，可以产生杂合抗生素4`-异戊酰螺旋霉素