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细胞学2章 质膜及细表面特化结构

????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? 膜脂的分子运动 影响膜流动的因素主要来自膜本身的组分、遗传因子及环境因子等。包括: 胆固醇:胆固醇的含量增加会降低膜的流动性。 脂肪酸链的饱和度:脂肪酸链所含双键越多越不饱和,使膜流动性增加。 脂肪酸链的链长:长链脂肪酸相变温度高,膜流动性降低。 卵磷脂/鞘磷脂:该比例高则膜流动性增加,是因为鞘磷脂粘度高于卵磷脂。 其他因素:膜蛋白和膜脂的结合方式、温度、酸碱度、离子强度等。 2.影响膜流动性的因素 主要有侧向扩散和旋转扩散两种运动方式。可用光脱色恢复技术和细胞融合技术检测侧向扩散。旋转扩散指膜蛋白围绕与膜平面垂直的轴进行旋转运动,膜蛋白的侧向运动受细胞骨架的限制,破坏微丝的药物如细胞松弛素B能促进膜蛋白的侧向运动。 ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? 1970年Larry Frye等人将人和和鼠的细胞膜用不同荧光抗体标记后,让两种细胞融合,杂种细胞一半发红色荧光、另一半发绿色荧光,放置一段时间后发现两种荧光抗体均匀分布。 3.膜蛋白的分子运动 用抗鼠细胞膜蛋白的荧光抗体(显绿色荧光)和抗人细胞膜蛋白的荧光抗体(显红色荧光)分别标记小鼠和人的细胞表面,然后用灭活的仙台病毒处理使两种细胞融合。lOmin后不同颜色的荧光在融合细胞表面开始扩散,40min后己分辨不出融合细胞表面绿色荧光或红色荧光区域,如加上不同的滤光片则显示红色荧光或绿色荧光都均匀地分布在融合细胞表面,这一实验清楚地显示了与抗体结合的膜蛋白在质膜上的运动。 利用细胞融合 技术观察蛋白 质运动 质膜的流动性是保证其正常功能的必要条件。例如跨膜物质运输、细胞信息传递、细胞识别、细胞免疫、细胞分化以及激素的作用等等都与膜的流动性密切相关。当膜的流动性低于一定的阈值时,许多酶的活动和跨膜运输将停止,反之如果流动性过高,又会造成膜的溶解。 4.膜流动性的生理意义 质膜的内外两层的组分和功能有明显的差异,称为膜的不对称性。 膜脂、膜蛋白和复合糖在膜上均呈不对称分布,导致膜功能的不对称性和方向性,即膜内外两层的流动性不同,使物质传递有一定方向,信号的接受和传递也有一定方向等。 样品经冰冻断裂处理后,细胞膜往往从脂双层中央断开,为了便于研究,各部分都有固定的名称: ES,质膜的细胞外表面(extrocytopasmic surface); PS,质膜的原生质表面(protoplasmic surface); EF,质膜的细胞外小页断裂面(extrocytopasmicface) ; PF,原生质小页断裂面(protoplasmic face) 。 (二)膜的不对称性 ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? 膜各个断面的名称 1.膜脂的不对称性: 脂分子在脂双层中呈不均匀分布,质膜的内外两侧分布的磷脂的含量比例也不同。PC和SM主要分布在外小页,而PE和PS主要分布在质膜内小叶。用磷脂酶处理完整的人类红细胞,80%的PC降解,而PE和PS分别只有20%和10%的被降解。 膜脂的不对称性还表现在膜表面具有胆固醇和鞘磷脂等形成的微结构域——脂筏。 2.膜蛋白的不对称性 膜蛋白的不对称性是指每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有明确的方向性和分布的区域性。各种膜蛋白在膜上都有特定的分布区域。 某些膜蛋白只有在特定膜脂存在时才能发挥其功能,如:蛋白激酶C结合于膜的内侧,需要磷脂酰丝氨酸的存在下才能发挥作用;线粒体内膜的细胞色素氧化酶,需要心磷脂存在才具活性。 3.复合糖的不对称性 无论在任何情况下,糖脂和糖蛋白只分布于细胞膜的外表面,这些成分

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