喘平缓释片体外释放与人体内吸收相关性研究.docVIP

喘平缓释片体外释放与人体内吸收相关性研究 　　[摘要] 目的：研究喘平缓释片体外释放与人体内吸收的相关性。方法：以麻黄碱、伪麻黄碱为指标成分，体外采用转篮法结合HPLC测定喘平缓释片在不同pH介质中的累积溶出率；体内采用尿药法结合HPLC测定尿液中的药物浓度；应用Wagner-Nelson法评价喘平缓释片体内外相关性。结果：喘平缓释片人体内不同时间点的吸收百分数F与体外累积溶出率f的线性回归方程分别为F麻黄碱=1.572 5f-20.729（R2=0.974 5），F伪麻黄碱=1.237f-0.147 6（R2=0.959 5）。结论：喘平缓释片体内-体外相关性良好，体外释放度测定方法可用于控制喘平缓释片内在质量和预测其生物利用度。 　　[关键词] 喘平方；缓释片；体外释放度；尿药法；体内外相关性 　　哮喘是临床最常见的疾病之一，发作快、持续时间长、多在夜间和凌晨发作。中医认为治喘标本兼治，积累了不少良方。喘平方以麻黄为君药，与洋金花等配伍，主要活性成分为生物碱类，如麻黄碱、伪麻黄碱等，具有显著的解痉、镇静、止咳平喘等功效。中药缓释制剂具有延长药效、减少用药剂量及次数、提高生物利用度等优势[1]。为此，将喘平方提取物制备成缓释片，可以显著延长药效，有效控制哮喘病在夜间和凌晨的发作。目前，本缓释片已获得专利（专利号ZL200910214281.X）。体内外相关性研究反映了整个体外释放曲线与血药浓度-时间曲线之间的关系，只有当体内外具有相关性，才能通过体外释放曲线预测体内情况、评价制剂在体内的优劣，为临床用药提供依据[2]。 　　本文通过对喘平缓释片体外释放度及人体内吸收率进行研究，评价其体内外相关性，为喘平缓释片的质量控制和用药安全提供依据。 　　1 材料 　　Agilent 1100高效液相色谱仪（PUMP G-1311A DE，ALS G-1313A DE，COLCOM G-1316A DE，degasser G-1379A JP，VWD G-1314A JP）；ZRS-8G智能溶出试验仪（天津大学无线电厂）；ZP17E压片机（上海天和制药机械有限公司）；DD5离心机（湖南赫西仪器装备有限公司）；AP-OIP VACUUM PUMP抽滤器（天津奥特赛恩斯仪器有限公司）；MTN-2800D氮吹浓缩仪（天津奥特赛恩斯仪器有限公司）；Vortex QL-901涡旋器（海门市其林贝尔仪器制造公司）；BP211D 电子分析天平（德国Sartorius）；KQ5200DE数控超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；TDA-Genpure超纯水机（南京易普易达科技发展有限公司）。 　　喘平普通片、缓释片（实验室自制）；盐酸麻黄碱（171241-200506）、盐酸伪麻黄碱（171237-200505）、内标物对照品（110805-200306）均购自中国食品药品检定研究院；十二烷基硫酸钠（天津市福晨化学试剂厂）；磷酸二氢钠（广东光华化学厂有限公司）；氢氧化钠（天津百世化工有限公司）；无水碳酸钠（天津市百世化工有限公司）；三乙胺（天津市富宇精细化工有限公司）；甲醇、乙腈为色谱纯（美国fisher公司）；其他试剂均为分析纯（广州化学试剂厂）；超纯水。 　　2 方法与结果 　　2.1 体外释放度研究 　　2.1.1 色谱条件 Synergi 4μ Polar-RP 80A色谱柱（4.6 mm×250 mm，4 μm，菲罗门）；流动相甲醇-0.092%磷酸溶液（含0.04%三乙胺，0.02%二正丁胺）（1.5∶98.5）；柱温25 ℃；流速1.0 mL·min1；检测波长210 nm。 　　2.1.2 对照品溶液制备 分别精密称取盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱对照品适量，分别用流动相水相溶解定容成盐酸麻黄碱0.039 7 g·L-1、盐酸伪麻黄碱0.039 6 g·L-1的混合对照品溶液，备用。 　　2.1.3 供试品溶液的制备 取喘平缓释片1片，碾碎，加水250 mL，搅拌至全部溶解，取1 mL用0.45 μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。 　　2.1.4 专属性试验 分别取伪麻黄碱、麻黄碱混合对照溶液和喘平缓释片供试品溶液，进样测定，色谱图见图1。结果表明，伪麻黄碱、麻黄碱峰形良好，可达到基线分离。 　　2.1.5 线性关系考察 精密称取干燥（105 ℃）至恒重的盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱对照品适量，分别用流动相水相溶解定容成盐酸麻黄碱0.039 7 g·L-1，盐酸伪麻黄碱0.039 6 g·L-1的混合对照溶液。分别精密吸取对照品溶液0.5，1，2，4，8，12，16，20 μL，测定其峰面积，以进样量（μg）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，盐酸麻黄碱回归方程Y=1 851.39X-4.400 0（r=0.99