雌激素对肝星状细胞lx-2趋化因子cxcl10表达及迁移的影响-effects of estrogen on expression and migration of cxcl 10 in hepatic stellate cells lx - 2 chemotactic factor.docxVIP

PAGE 10 PAGE 10华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文英文缩略词表英文缩写英文全称中文ACadenylate cyclase腺苷酸环化酶ATangiotensin receptors血管紧张素受体BDLbile duct ligation胆总管结扎BMbone marrow骨髓E2 ECMestradiol extracellular matrix雌二醇 细胞外基质ERestrogen receptor雌激素受体ERKextracellular signal-regulated kinase细胞外信号调节激酶FBSfetal bovine serum胎牛血清HCVhepatitis C virus丙型肝炎病毒HSChepatic stellate cell肝星状细胞IP10IFN-γ inducible protein 10IFN-γ 诱导蛋白 10LCTliver cell transplantation肝细胞移植LPSlipopolysaccharide脂多糖NASHnon-alcoholic steatohepatitis非酒精性脂肪性肝炎NF-κBnuclear transcription factor κB，核转录因子κBNKnatural killer cell自然杀伤细胞PPAR-γPeroxisome Proliferator Activated Receptor过氧化物酶体增殖物激活γ受体γSERMselective estrogen receptor modulator选择性雌激素受体调节剂TGF-βtransforming growth factor-β转化生长因子 βTIMPtissue inhibitor of metalloproteinase金属蛋白酶组织抑制剂VEGFvascular endothelial growth factor血管内皮生成因子华中科技大学硕士 学位论华中科技大学硕士 学位论文摘 要目的： 研究雌激素对肝星状细胞系 LX-2 趋化因子 CXCL10 表达的影响，以及雌激 素对趋化因子 CXCL10 诱导的 LX-2 细胞迁移的影响，探讨雌激素在肝纤维化疾病进 展中发挥保护性作用的机制。方法： Real-time PCR 和 western blot 方法检测不同处理时间的雌二醇对肝星状细胞系 LX-2 趋化因子 CXCL10 mRNA 和蛋白表达的影响。Transwell 实验检测雌二醇对趋 化因子 CXCL10 诱导的 LX-2 细胞迁移的影响。结果： 1、雌二醇处理肝星状细胞系 LX-2 3h 组、12h 组 CXCL10 mRNA 表达相对水平（分别为 0.33± 0.02，0.59±0.04）明显低于对照组（1.00±0.02），差异有统计 学意义（p0.01）；处理 24h 组 CXCL10 mRNA 表达相对水平（0.99±0.00）与对照组 相当，差异无统计学意义（p0.05）。处理 12h 组与处理 3h 组、处理 24h 组与处理 12h 组相比，CXCL10 mRNA 表达相对水平均升高，差异有统计学意义（均 p0.05）。2、雌二醇处理 LX-2 3h 组、12h 组 CXCL10 蛋白表达相对水平（分别为 0.64±0.03，0.84±0.12）均低于对照组（1.00±0.00），差异有统计学意义（p0.01，p0.05）； 处理 24h 组 CXCL10 蛋白表达相对水平（0.97±0.09）与对照组相当，差异无统计学 意义（p0.05）。处理 12h 组与处理 3h 组相比，CXCL10 蛋白表达相对水平上升，差 异有统计学意义（p0.05），处理 24h 组与处理 12h 组相比，CXCL10 蛋白表达相对 水平变化不明显，差异无统计学意义（p0.05）。3、下室加入浓度为 10ng/ml CXCL10 诱导后，与空白对照组相比，迁移的 LX-2 细胞明显增多(227.67± 8.41 vs 110.11±7.88)，差异有统计学意义（p0.01），上室加 入雌二醇后，10ng/ml CXCL10 诱导的 LX-2 迁移细胞数减少(154.19± 6.11)，与未加 入雌二醇的 10ng/ml CXCL10 诱导组比，差异有统计学意义（p0.01）。结论： 雌激素能抑制肝星状细胞 LX-2 CXCL10 的表达，雌激素可能通过抑制CXCL10 的表达，继而抑制 CXCL10 诱导的肝星状细胞迁移，发挥其在肝纤维进程中 的保护作用，从而延缓肝纤维化的病情进展。 关键词：肝纤维化；雌激素；趋化因子；CXCL10；迁移ABSTRACTObjective：To determine the effect of estroge