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绿叶中色素提取和分离实验改进和探究 　　摘要：阐述绿叶中色素提取和分离实验的地位和作用，以及实验的目的、要求，对分离实验的创新与改进，实验的方法、器材准备等工作进行解析，并提出要求。 　　关键词：绿叶；色素；实验；方法；改进 　　一、本实验的地位和作用 　　叶绿体是光合作用的场所，而光合作用又是高中生物学习的重点和难点内容。因此做好绿叶中色素的提取和分离实验，有助于学生理解光合作用色素的种类和作用，加强学生对光合作用的理解和掌握。 　　二、实验的目的和要求 　　1、进行绿叶中色素的提取和分离。 　　2、探究绿叶中含有几种色素。 　　三、实验原型及不足之处 　　1、原实验选材用菠菜，但菠菜有很强的季节性，难于取材。 　　2、进行色素分离时要用层析液含有苯，苯有毒且挥发性很强，易对学生身体健康造成影响。 　　3、分离色素研磨液用漏斗过滤较慢，并且需要的仪器多，较复杂。 　　4、画滤液细线工具用毛细吸管易断，画出的线不均匀。 　　四、实验创新与改进之处 　　（一）实验材料的改进： 　　对校园多种常绿植物进行实验比较，选用小叶女贞、迎春叶代替菠菜叶，所得到的实验效果较好，又可以克服菠菜的季节性，便于取材。 　　（二）提取液的改进 　　用无水乙醇代替有毒易挥发的苯来提取绿叶中的色素，易取材、安全、环保。 　　（三）色素提取的改进 　　课本中是将色素研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗基部放一块单层尼龙布）中进行过滤。改进为取尼龙布折叠2层盖在研钵上，直接用吸管吸取研磨液，简化步骤，节省了仪器。 　　（四）划滤液细线的改进 　　用干净的盖玻片，在滴有研磨液的载玻片沾取，再印在滤纸条上，色素液晾干后再重复4-5次，印出的色素滤液线又细又齐又匀，比用毛细吸管省时省力。 　　（五）层析液的改进 　　方案一、石油醚：丙酮（10∶1）配制而成的层析液代替有石油醚：丙酮：苯（20：2：1）配置的层析液，分离色素需要的时间缩短，同时也省去了有毒的苯试剂，分离效果明显。 　　方案二、用93号汽油代替有石油醚、丙酮和苯配置成的层析液，避免学生接触有毒物质，且易取材、安全、及环保。 　　（六）层析方法的改进： 　　方案一、将干燥的条形定性滤纸的一端剪去两角，并在距这一端1CM处用铅笔画一条细的横线。用干净的盖玻片划滤液细线后放到由石油醚：丙酮（10∶1）配制而成的层析液中层析，能清楚看到四条色素带分离开来，分离效果非常明显。 　　方案二、取平面培养皿1只，将一干燥的圆形定性滤纸盖在培养皿中，用吸管在圆形滤纸（直径为9cm）中央滴一滴色素提取液，晾干后重复2-3次，滤纸中央形成小圆形的色素斑。再用吸管缓慢在色素斑上滴93号汽油，会观察到渐渐分离开的三个色素环，由内而外分别是黄绿色、蓝绿色、黄色，现象明显、美观、操作易掌握。 　　实验原型与实验改进对比图表 　　项目实验原型实验改进 　　实验选材菠菜小叶女贞、迎春叶 　　提取液丙酮无水乙醇 　　色素提取研磨液玻璃漏斗过滤尼龙布盖在研钵上，直接用吸管吸取 　　划滤液细线毛细吸管盖玻片 　　层析液石油醚：丙酮：苯（20∶2∶1）方案一、石油醚：丙酮（10∶1） 　　方案二、用93号汽油 　　层析方法条形定性滤纸放入石油醚：丙酮：苯（20∶2：1）层析液方案一、条形定性滤纸放到由石油醚：丙酮（10∶1）层析 　　方案二、圆形定性滤纸中央滴一滴色素提取液，再用93号汽油推开 　　五、实验器材 　　新鲜的绿色叶片（小叶女贞、迎春花叶、菠菜叶等） 　　干燥的定性滤纸（圆形定性滤纸、条形定性滤纸）、烧杯、研钵、尼龙布、培养皿盖、药勺、量筒（10ml）、剪刀、吸管、载玻片、盖玻片 　　无水乙醇、层析液（石油醚：丙酮=10：1）、汽油、二氧化硅、碳酸钙 　　六、实验原理及装置说明 　　绿叶中的色素溶于有机溶剂、故可用无水乙醇将色素提取出来。利用色素在层析液中的溶解度不同，可以将四种色素分离。 　　装置如下： 　　七、实验过程 　　（一）提取绿叶中的色素 　　取适量（5g）小叶女贞叶片、迎春花叶、菠菜叶等剪碎后，放入研钵中。向研钵中放入少量二氧化硅和碳酸钙，加入10mL无水乙醇，迅速、充分地研磨。等待色素充分溶解后，在研钵口部放折叠2层尼龙布，直接用吸管隔着纱布吸取研磨液。 　　（二）制备滤纸条 　　将干燥的定性滤纸剪成长6cm、宽1cm的滤纸条，将滤纸条一端剪去两角，在此端距顶端1cm处用铅笔画一条细横线。 　　（三）画滤液细线 　　滴2-3滴于载玻片上，手拿另一盖玻片，将色素刮抹均匀。净值半分钟，此时酒精大部分会挥发，接用盖玻片蘸取色素提取液在滤纸条铅笔画细线处盖印划线，重复3-4次。 　　（四）分离绿叶中的色素： 　　方案一： 　　将滤纸条画线一端朝下，轻轻插入由石油醚：丙酮（10∶1）配制而成的层析液层析，盖上培养皿盖。（注意：不